WNK3通过诱导上皮间质化转变调控低氧下U87细胞侵袭

发布时间：2021-07-12 15:55

　　目的:胶质瘤起源于神经胶质细胞,是成人颅内最常见的恶性肿瘤,其恶性程度最高的是多形性胶质瘤母细胞瘤（GBM）。因胶质母细胞瘤恶性程度极高,常浸润周围脑组织与正常组织分界不清,以致手术难以完全切除。目前采用手术、标准放疗及化疗等综合治疗手段,平均生存期只有14个月,难以治愈。胶质瘤患者个体化基因表型的改变可能成为今后治疗的突破口。WNK激酶是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,因功能领域缺乏保守的赖氨酸而得此名称,目前已经发现4名成员,分别是WNK1、WNK2、WNK3和WNK4。其中WNK1、WNK2和WNK3已经广泛参与到肿瘤的增殖、凋亡、侵袭以及肿瘤微环境的过程。认为WNK2可能是具有神经系统肿瘤特异性的抑癌基因,WNK1和WNK3参与到肿瘤的侵袭,凋亡。此外,GBM肿瘤内广泛的低氧坏死区和血管形成,是其突出组织学的特征。研究显示,低氧可能导致肿瘤表型发生改变,包括转移增多、肿瘤复发、抗化疗、抗放疗、侵袭增加、患者生存率下降、基因组不稳定、凋亡潜能下降、基因表达改变、癌基因激活,诱导血管生成等作用。然而,胶质瘤适应低氧微环境的分子机制知之甚少,并且WNK激酶在低氧下对胶质瘤的调控研究尚不明... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

WNK3免疫组织化学（IHC）在胶质瘤组织和细胞系的表达

中国医科大学硕士学位论文3.2 低氧条件下 WNK3 在 U87 细胞系中表达上调Western blot 检测低氧和常氧条件下 WNK3 在 U87 细胞系中的表达。细胞在常氧和低氧（1%氧 1 h、3 h、6 h、12 h、24 h）条件下培养并测定 WNK3 表达水平（图2A）。在低氧条件下培养 U87 细胞 WNK3 表达上调（图 2B），并且发现 WNK3 表达水平在低氧培养 24 小时后最高（P＜0.001）。

图 3.3 WNK3 敲除显著抑制低氧下 U87 细胞侵袭A：转染敲除 U87 细胞中 WNK3 表达后通过 Western blot 验证，β实相关蛋白表达（A）验证结果。C：结晶紫染色检验转染后 U87 细胞侵袭常氧和低氧培养条件下，Transwell 侵袭小室中转染后的 U87 细胞数量。*P***P < 0.001。3.4 WNK3 通过诱导 EMT 调控低氧环境下 U87 细胞侵为了进一步研究在 U87 细胞侵袭 WNK3 的作用，我们检测了Snail1、Vimentin 在 WNK3 shRNA U87 细胞和对照转染组细胞在 WNK3 shRNAU87 细胞中，Snail1 和 Vimentin 表达水平在常氧（P＜0.001）培养条件下显著降低（图 4A，B）。更重要的是胞中，Snail1 和 Vimentin 的表达在低氧下更加显著（图 4）。E-cadherin，这是一个在 EMT 过程中被下调的标记。E-cadherin 的


本文编号：3280212