Pannexins在大鼠脑出血中作用机制的研究

发布时间：2017-04-26 21:11

  本文关键词：Pannexins在大鼠脑出血中作用机制的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：第一部分Pannexins在大鼠脑出血后脑组织中表达变化目的:探讨Pannexins家族蛋白(包括Panx1,Panx2,Panx3)在大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后脑组织中不同时间点的表达情况。方法:选取42只成年雄性SD大鼠,随机分为以下7个实验组:对照组、脑出血6小时组、12小时组,24小时组,48小时组,72小时组,和1周组。每个实验组各6只大鼠。通过立体定向仪引导将Ⅶ型胶原酶1微升注入大鼠右侧尾壳核,建立实验性脑出血大鼠模型。模型建立后6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、1周分别将各组大鼠处死,取出大鼠双侧大脑皮层脑组织,用Western blot及免疫荧光等实验方法,检测Pannexins家族蛋白在脑出血后各个时间点的表达水平,并进行统计学分析。结果:大鼠脑出血后脑组织中Panx蛋白表达1.Western blot结果显示:Panx1在对照组及ICH各时间点组大鼠脑组织中均有表达。Panx1在ICH后48小时表达水平达到高峰;与对照组相比较,Panx1在ICH后48小时及72小时表达水平显著增高(P0.01),在ICH后1周表达水平明显增高(P0.05)。Panx2及Panx3在对照组及ICH各时间点组大鼠脑组织中也均有表达,但对照组与ICH各个时间点组的Panx2及Panx3表达水平均无统计学差异(P0.05)。2.免疫荧光实验结果证实,Panx1蛋白在ICH组的表达水平呈现随脑出血时间延长而逐渐增高趋势,并在脑出血后48h达到高峰。而Panx2、Panx3蛋白在ICH各时间点组中的表达水平与对照组比较均无统计学差异。结论:1.Panx1在大鼠脑出血后表达水平明显升高,在脑出血后48小时其表达水平达到高峰。2.Panx2、Panx3在ICH后脑组织中表达水平无明显变化(无统计学差异)。第二部分生胃酮对大鼠脑出血后细胞凋亡和变性干预作用研究目的:建立大鼠ICH模型,以生胃酮(carbenoxolone,CBX)处理,探究CBX对大鼠ICH后继发性脑损伤及认知功能障碍的作用。方法:选取24只成年雄性SD大鼠,随机分为以下四组:对照组、ICH组、ICH+CBX低剂量干预组(10mg/kg)和ICH+CBX高剂量干预组(20mg/kg),每个实验组各6只大鼠。通过立体定向引导将Ⅶ型胶原酶1微升注入大鼠右侧尾壳核,建立实验性脑出血大鼠模型。在CBX干预组,模型建立后1小时腹腔注射CBX溶液(低剂量组10mg/kg及高剂量组20mg/kg)。ICH动物模型建立完成后第47小时开始对各组大鼠进行神经功能评分,第48小时处死各组大鼠,取出大鼠出血侧大脑皮层脑组织。用Western blot测定血清白蛋白及细胞凋亡相关蛋白caspase-3的表达情况,采用TUNEL荧光染色与FLUORO-JADE B染色检测大鼠脑出血周围组织神经元细胞凋亡及变性情况。结果:大鼠神经功能评分:对照组SD大鼠的活动及食欲正常。ICH组SD大鼠精神萎靡,毛发蓬乱,摄食欲望较低,呈头低位蜷缩状,活动减少。CBX干预组SD大鼠的活动及食欲较ICH组均明显改善。ICH组SD大鼠神经功能评分较正常组显著升高(P0.01),CBX低剂量干预组SD大鼠神经功能评分明显低于ICH组(P0.05),CBX高剂量干预组SD大鼠神经功能评分显著低于ICH组(P0.01)。脑水肿测定试验结果:与对照组比较,ICH组SD大鼠脑水含量百分比明显增高(P0.05),CBX低剂量干预组SD大鼠脑水含量百分比明显低于ICH组(P0.05),CBX高剂量干预组大鼠脑水含量百分比显著低于ICH组(P0.01)。Western blot结果显示:与对照组相比,Active-Caspase3及Albumin在ICH组中表达水平均有明显增高(P0.05);而与ICH组相比,Active-Caspase3及Albumin在CBX高剂量干预组中表达水平均有明显下降(P0.05),但是在CBX低剂量干预组中其表达水平无明显变化(P0.05)。TUNEL荧光染色试验结果:与对照组比较,ICH组SD大鼠脑组织神经元凋亡率显著增高(P0.01),CBX低剂量干预组神经元细胞凋亡率明显低于ICH组(P0.05),CBX高剂量干预神经元细胞凋亡率显著低于ICH组(P0.01)。FLUORO-JADE B染色试验结果:与对照组比较,ICH组SD大鼠脑组织神经元变性显著增多(P0.01),CBX低剂量干预组神经元变性率明显低于ICH组(P0.05),CBX高剂量干预组神经元变性显著低于ICH组(P0.01)。结论:通过生胃酮干预,ICH大鼠脑组织的神经元凋亡率和变性率明显下降,ICH后继发性脑损伤程度得以改善。同时,经过CBX干预的ICH大鼠神经认知功能的恢复较ICH组有明显提高。CBX干预在脑出血后继发性脑损伤中可能发挥脑保护作用。
【关键词】：脑出血 Pannexins Panx1 Panx2 Panx3 脑出血 生胃酮 Western blot TUNEL FLUORO-JADE B
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R743.34
【目录】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-11
• 前言11-17
• 参考文献14-17
• 第一部分 Pannexins在大鼠脑出血后脑组织中表达变化17-30
• 材料和方法17-21
• 结果21-26
• 讨论26-28
• 结论28
• 参考文献28-30
• 第二部分 生胃酮（CBX）对大鼠脑出血后细胞凋亡和变性的干预作用研究30-44
• 材料和方法31-36
• 结果36-40
• 讨论40-41
• 结论41-42
• 参考文献42-44
• 综述44-55
• 参考文献51-55
• 英文缩写及中英文对照表55-56
• 攻读学位期间公开发表的论文56-57
• 致谢57-58

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 陈同度,张昌颖;素食大鼠的贫血现象[J];营养学报;1957年04期

2 陈伟强;赵善广;;自制注射用大鼠固定装置[J];上海实验动物科学;1992年04期

3 肖柳英,林培英,冯昭明,张丹;不同周龄的SD大鼠生理、生化及体重的正常值测定[J];中药新药与临床药理;1996年03期

4 李淑云;简易大鼠灌胃器的制作[J];锦州医学院学报;2001年04期

5 杨明智,陈积圣;一种大鼠抓取与固定的新工具介绍[J];上海实验动物科学;2001年03期

6 戴英,陆群;复方H_(505)对Wistar大鼠外周血的血液流变学指标的影响[J];中国血液流变学杂志;2001年01期

7 韦应波,孙喜庆,曹新生,姚永杰,冯岱雅,杨长斌;+Gz暴露时间对大鼠记忆功能和行为的影响[J];航天医学与医学工程;2003年01期

8 吕学军,郭俊生,李敏,周利梅,张永娟;晕船大鼠体内铁含量的变化[J];中国职业医学;2003年04期

9 汤仁仙,王迎伟,王慧,周峰;201A中药合剂对大鼠抗肾小球基底膜肾炎病变的影响[J];徐州医学院学报;2003年06期

10 孙同柱,付小兵,翁立新,梁雪梅,陈伟;介绍一种简易的大鼠保定方法[J];上海实验动物科学;2004年01期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 尹音;孙振宇;胡敏;李冬霞;;持续性高正加速度对大鼠颞颌关节损伤的作用[A];第八届全国颞下颌关节病学及（牙合）学大会论文汇编[C];2011年

2 祝~=骧;iJ梊霞;洃克琴;崔素英;文允摪;，

本文编号：329250