Cav1不同表达对U87胶质瘤细胞的影响以及细胞外ATP对U87胶质瘤侵袭和迁移研究

发布时间：2021-08-07 19:39

　　一、研究背景及目的：胶质瘤（glioma）是人颅内最常见的肿瘤，其生物学特性中最重要的特点是肿瘤细胞侵入到正常脑组织，围绕在原发灶周围形成所谓的“卫星肿瘤灶”，而且常要侵袭脑的重要功能区，由于没有合理的切实可行的辨认肿瘤边界的方法或者技术，因此一直以来手术切除肿瘤的程度很有限，而且术后肿瘤复发的几率随着病理级别的升高而升高，更为可怕的是人脑胶质瘤中的大约50%左右是胶质母细胞瘤（glioblastoma），它们的特性是侵袭性强、复发时间短、预后差。现代计算机断层扫描、术前MRI（核磁共振）等影像技术仍难以准确的确定肿瘤边界，即使术中使用了普通显微镜，但是放大倍数还很有限，仍然难以辨认肿瘤界限，而且残留的肿瘤细胞即使仅占1mm³体积细胞数目将达到109个，因此，研究胶质瘤侵袭性生长的机制对于临床治疗胶质瘤患者有着重要的意义。本课题旨在探讨恶性胶质瘤侵袭机制的宏观层面为出发点，研究了Cav1（Caveolin-1）、细胞外三磷酸腺苷（Adenosine Triphosphate，ATP）在脑胶质瘤侵袭性生长和迁移中的作用。分析了Cav1不同表达在U87胶质瘤中生长和侵... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：103 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

阳性克隆产物Pf"R

图 1 倒置显微镜下观察复苏后的细胞(×200)7 人脑胶质瘤细胞系中 Cav1 表达情况有明确了 U87 人脑胶质瘤细胞系中，Cav1 是否呈阳性表调节 U87 人脑胶质瘤中 Cav1 的表达。免疫组化实验结果胞中 Cav1 呈阳性表达(图 2)。

第三军医大学硕士学位论文后荧光显微镜下观察慢病毒上报告基因 GFP 的表达情况，感染时间达到 7 天后收集细胞蛋白进行 Western Blot 检测实验，进而判断目的基因表达效果。结果显示，感染 3天后，U87 脑胶质瘤细胞可表达绿色荧光，感染效率均大于 90%(图 3)。感染时间达到7 天后 Western-blot 检测 U87 脑胶质瘤细胞中 Cav1 表达情况显示，U87-NC、U87-siCav1以及 U87-Cav1 慢病毒颗粒感染 U87 脑胶质瘤细胞后 GFP 均有表达，U87-siCav1 慢病毒颗粒感染 U87 脑胶质瘤细胞后有效降低了 Cav1 表达，U87-Cav1 感染 U87 脑胶质瘤细胞后明显提高了 Cav1 蛋白水平(图 4)。

【参考文献】：
期刊论文
[1]甲基-β-环糊精干扰脂质微区影响脑胶质瘤细胞系C6侵袭和迁移的体外研究[J]. 李飞,李梅,卢佳友,朱刚,林江凯,孟辉,吴南,陈志,冯华.  中国现代神经疾病杂志. 2008(05)



本文编号：3328410