氯化锂—匹罗卡品致痫大鼠海马CA3区神经元AIS的可塑性研究

发布时间：2021-08-11 14:20

　　目的研究氯化锂-匹罗卡品癫痫模型SD大鼠海马CA3区神经元轴突起始段（axon initial segment, AIS） Nav1.6和ankyrin G的表达分布及其变化规律,探讨AIS的可塑性变化在癫痫发病中的作用。方法6-8周龄健康雄性SD大鼠随机分为模型组（N=76只）和对照组（N=36只）,模型组大鼠予腹腔注射氯化锂-匹罗卡品致痫,对照组大鼠予生理盐水假处理。分别于癫痫持续状态（status epilepticus, SE）诱导成功后24小时（急性期）、7天（静止期）和60天（慢性期）三个时间点取模型组和对照组大鼠制备海马冰冻切片及提取海马CA3区总蛋白和mRNA。采用免疫荧光双标染色、Western blot及Real-Time PCR方法检测Nav,1.6和ankyrin G在大鼠海马CA3区神经元的共定位及其表达量的变化。结果免疫荧光染色显示,Nav,1.6和ankyrin G在海马CA3区的锥体神经元AIS区共表达,而在胞膜区仅有较低密度的Nav,1.6表达；实验组和对照组AIS的染色模式在SE后各期均一致。Western blot检测显示Nav,1.6在急性期和慢... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
目录
縮略词表
第一章 前言
第二章 材料与方法
    2.1 动物及主要试剂
    2.2 主要仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 动物分组与癫痫模型制备
        2.3.2 实验时间点的选择
        2.3.3 冰冻切片的制备
        2.3.4 海马组织的分离与保存
        2.3.5 免疫荧光双标
        2.3.6 Western Blot检测
        2.3.7 Real-Time PCR检测
    2.4 数据统计分析
第三章 实验结果
    3.1 氯化锂-匹罗卡品癫痫动物模型
        3.1.1 行为学观察
        3.1.2 造模数据统计
    3.2 Na_v1.6和ankyrin G在海马CA3区的共定位表达
    3.3 海马CA3区锥体神经元Na_v1.6和ankyrin G蛋白的表达
    3.4 海马CA3区组织Na_v1.6和ankyrin G mRNA的表达
        3.4.1 RNA的完整性检测结果
        3.4.2 熔解曲线和扩增曲线
        3.4.3 SCN8A和ANK-3 mRNA的表达水平
第四章 讨论
    4.1 氯化锂-匹罗卡品癫痫模型的建立
    4.2 神经元AIS区Na_v1.6和ankyrin G的共表达
    4.3 海马CA3区Na_v1.6蛋白及其mRNA的表达变化
    4.4 海马CA3区ankyrin G蛋白及其mRNA的表达变化
第五章 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
在读期间完成的论文



本文编号：3336313