阿糖胞苷囊泡型磷脂凝胶脑部植入剂的研究

发布时间：2021-08-16 10:53

　　脑胶质瘤发病率高,手术难以完全切除,需要术后化疗,但传统的给药方式很难使高浓度药物到达肿瘤部位,具有高死亡率及高原位复发率的特点。本研究首次将阿糖胞苷制成囊泡型磷脂凝胶,作为术后局部缓释化疗制剂用于脑胶质瘤综合治疗,其优势在于：该制剂具有缓慢释放的特性,长时间作用于肿瘤细胞达到抑制肿瘤复发的作用；成功避开血脑屏障,使较高浓度的药物直接作用于肿瘤切除部位,有效杀灭残存的肿瘤细胞；磷脂作为其主要载体材料具有较好的生物相容性,且无毒性。在处方前研究中,建立了阿糖胞苷（Ara-C）、磷脂及溶血磷脂的体外含量测定方法。Ara-C在不同水性介质中的溶解度均大于452.7mg/ml,油水分配系数小,亲脂性弱,随着pH的增加而降低；其脂质体／水分配系数为2.51±0.53,推测该药具有较好的细胞膜亲和力。从制剂的外观、粒径、包封率、体外释放、流变学等方面研究了阿糖胞苷囊泡型磷脂凝胶（Ara-C VPGs）的性质及灭菌稳定性。透射电镜观察,其分散后的结构大多数为小单层脂质体；冷冻蚀刻电镜观察凝胶内部真实结构为相邻囊泡紧密堆积形成了独特的三维网状立体结构,在结构上区别于脂质体和脂质体凝胶。作为载体材料的磷... 

【文章来源】：沈阳药科大学辽宁省

【文章页数】：122 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
    参考文献
第一章 处方前研究
    1. 仪器和材料
        1.1 仪器
        1.2 材料
    2. 方法和结果
        2.1 阿糖胞苷体外分析方法
            2.1.1 检测波长
            2.1.2 色谱条件
            2.1.3 方法专属性
            2.1.4 标准曲线
            2.1.5 检测限与定量限
            2.1.6 精密度
            2.1.7 重复性
            2.1.8 稳定性
            2.1.9 回收率
            2.1.10 样品含量测定
        2.2 磷脂体外分析方法
            2.2.1 标准曲线
            2.2.2 精密度
            2.2.3 回收率
            2.2.4 磷脂含量测定
        2.3 溶血磷脂体外分析方法
            2.3.1 色谱条件
            2.3.2 方法专属性
            2.3.3 标准曲线
            2.3.4 精密度
            2.3.5 回收率
        2.4 阿糖胞苷基本理化性质的研究
            2.4.1 阿糖胞苷在不同介质中的溶解度
            2.4.2 阿糖胞苷在不同pH中油/水分配系数
            2.4.3 阿糖胞苷脂质体/水分配系数
    3. 讨论
    4. 本章小结
    参考文献
第二章 阿糖胞苷囊泡型磷脂凝胶的制备、表征 及灭菌稳定性研究
    一、阿糖胞苷囊泡型磷脂凝胶的制备和表征
        1. 仪器和材料
            1.1 仪器
            1.2 材料
        2. 方法
            2.1 阿糖胞苷囊泡型磷脂凝胶的制备
                2.1.1 高压均质法
                2.1.2 不对称离心法
            2.2 形态观察
                2.2.1 透射电镜
                2.2.2 冷冻蚀刻电镜
            2.3 包封率的测定
            2.4 粒径的测定
            2.5 体外释放测定
                2.5.1 平衡透析法
                2.5.2 扩散池法
        3. 结果与讨论
            3.1 形态观察
            3.2 包封率影响因素考察
            3.3 制备方法考察
            3.4 处方因素的考察
                3.4.1 分散介质pH的影响
                3.4.2 磷脂种类的影响
                3.4.3 药物浓度的影响
                3.4.4 磷脂浓度的影响
                3.4.5 磷脂/胆固醇比例的影响
            3.5 体外释放方法考察
    二、阿糖胞苷囊泡型磷脂凝胶的灭菌稳定性研究
        1. 仪器和材料
            1.1 仪器
            1.2 材料
        2. 方法
            2.1 阿糖胞苷囊泡型磷脂凝胶的制备
            2.2 形态的观察
            2.3 包封率
            2.4 粒径及zeta电位的测定
            2.5 体外释放
            2.6 流变学性质
            2.7 灭菌的稳定性
                2.7.1 磷脂氧化指数的测定
                2.7.2 溶血磷脂的测定
                2.7.3 体外红细胞溶血实验
        3. 结果和讨论
            3.1 透射电镜下形态
            3.2 粒径、zeta电位和包封率
            3.3 体外释放
            3.4 流变特性
            3.5 灭菌的稳定性
                3.5.1 药物的稳定性
                3.5.2 磷脂氧化
                3.5.3 磷脂水解
                3.5.4 体外红细胞溶血
        4. 本章小结
    参考文献
第三章 聚氨基酸吸附-电荷修饰复合型VPGs的设计与评价
    1. 仪器和材料
        1.1 仪器
        1.2 材料
    2. 方法
        2.1 聚氨基酸吸附-电荷修饰复合型VPGs的制备
        2.2 形态的观察
            2.2.1 透射电镜
            2.2.2 光学显微镜
        2.3 包封率
        2.4 粒径及zeta电位的测定
            2.4.1 粒径测定
            2.4.2 zeta电位的测定
        2.5 体外释放测定
        2.6 流变学性质的测定
    3. 结果和讨论
        3.1 透射电镜下形态
        3.2 粒径、zeta电位和包封率
        3.3 体外释放
        3.4 流变特性
        3.5 光学显微镜下形态验证
    4. 本章小结
    参考文献
第四章 阿糖胞苷囊泡型磷脂凝胶大鼠脑内分布 及安全性研究
    1. 仪器与材料
        1.1 仪器
        1.2 材料
        1.3 动物
    2. 方法
        2.1 脑内药物植入
        2.2 脑组织及血浆样品的采集、处理
            2.2.1 血浆样品的处理
            2.2.2 组织样品的处理
        2.3 脑组织及血浆样品中药物的测定
            2.3.1 色谱及质谱条件
            2.3.2 方法学验证
        2.4 脑内荧光成像的观察
        2.5 制剂安全性研究
    3. 结果与讨论
        3.1 阿糖胞苷囊泡型磷脂凝胶在脑组织内的药物分布
        3.2 阿糖胞苷囊泡型磷脂凝胶外周血浆中的药物浓度
        3.3 脑内荧光成像的观察
        3.4 脑组织的安全性
    4. 本章小结
    参考文献
第五章 阿糖胞苷囊泡型磷脂凝胶治疗胶质瘤药效学研究
    1. 仪器与材料
        1.1 仪器
        1.2 材料
    2. 方法
        2.1 Ara-C VPGs体外抑制肿瘤细胞生长实验
            2.1.1 C6及U87-MG细胞的复苏与培养
            2.1.2 分组及加药
            2.1.3 细胞生存率和细胞生长抑制率
            2.1.4 荧光显微镜观察细胞摄取
        2.2 Ara-c VPGs对大鼠C6胶质瘤抑制作用
            2.2.1 胶质瘤皮下模型的建立
            2.2.2 实验动物分组及给药方案
            2.2.3 观察指标
        2.3 Ara-c VPGs对裸鼠U87-MG胶质瘤抑制作用
            2.3.1 胶质瘤皮下模型的建立
            2.3.2 实验动物分组及给药方案
            2.3.3 观察指标
    3. 结果与讨论
        3.1 细胞毒性实验结果
        3.2 荧光显微镜观察细胞摄取情况
        3.3 动物模型的建立
        3.4 皮下C6胶质瘤荷瘤大鼠体内抑瘤实验结果
            3.4.1 生长状态
            3.4.2 体重的变化
            3.4.3 瘤体积的变化
            3.4.4 肿瘤增殖率
            3.4.5 瘤重及抑瘤率
        3.5 皮下U87-MG胶质瘤荷瘤裸鼠体内抑瘤实验结果
            3.5.1 生长状态
            3.5.2 体重的变化
            3.5.3 瘤体积的变化
            3.5.4 肿瘤增殖率
            3.5.5 瘤重及抑瘤率
    4. 本章小结
    参考文献
全文结论
    本课题创新点
致谢
作者简介
附件


【参考文献】：
期刊论文
[1]多囊脂质体的研究进展[J]. 王晓梅,唐星,何海冰.  中国新药杂志. 2006(15)



本文编号：3345540