短暂性脑缺血对小鼠海马区神经发生及Cystatin C表达的影响

发布时间：2021-08-26 21:18

　　目的利用小鼠急性全脑缺血模型观察急性脑缺血对海马神经发生及Cystatin C表达的影响。方法将C57BL/6雄性小鼠（6⁸周）随机分为脑缺血组和假手术组。采用双侧颈动脉结扎法建立短暂性全脑缺血模型;利用HE染色观察脑缺血后不同时间（1周,2周）海马区形态学变化;采用免疫组织荧光染色观察缺血后海马区cleave-caspase-3表达变化;利用EdU染色观察缺血3 d、1周、2周和4周后,海马区神经干细胞增殖变化;利用免疫组织荧光染色观察缺血3 d、1周、2周和4周后,海马区nestin、GFAP及少突胶质细胞特异蛋白（OSP）等蛋白表达变化,判断脑缺血对海马区神经干细胞分化的影响。利用免疫组织荧光染色观察缺血3 d、1周和2周后,海马区Cystatin C表达变化以及Cystatin C在海马区不同细胞类型中的变化。结果脑缺血1周后,小鼠海马CA1区神经元数目减少,cleave-caspase-3阳性细胞增加（P<0.05）。海马DG区EdU阳性细胞数量在缺血3 d后开始增加（P<0.05）,缺血1周后达到峰值（P<0.05）;海马CA1区Ed... 

【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

显微止血夹夹闭C57BL/6小鼠双侧颈总动脉

分离心包膜，暴露心脏，在心尖部剪出一个微小的液针从小口处进针，经左心室穿入升主动脉并用血管夹固定，使剪一个小口，开放静脉血，以生理盐水经升主动脉先快速滴注冲心耳流出后，再减速滴注，以清除整个循环中血细胞；待右心耳血液流出，观察肝脏颜色变成茶色后，改用4％多聚甲醛（pH7.4进行缓慢灌注，为确认多聚甲醛是否经过小鼠体液循环，过程中剧烈抽动为灌注准确，待小鼠躯干及尾巴僵硬强直后灌注完毕。处剪下头部，拨开头皮，暴露颅骨，用咬骨钳剥离颅骨取出脑组保证脑组织的完整，将取出的小鼠脑组织快速置于有4%多聚甲醛（图2），4℃冰箱进行后固定。

宁夏医科大学硕士研究生学位论文 第一部分 短暂性脑缺血对 C57BL/6 小鼠海马区神经发生的影响结果1、脑缺血后海马区神经元形态学特点HE 染色镜下可见正常组（假手术组）海马 CA1 区神经细胞排列紧密、多层，形态无明显病理学改变（Fig. 4A）。缺血再灌注 1 周后，小鼠海马 CA1 区神经细胞数显著减少；部分剩余细胞失去正常形态结构，表现为细胞核染色加深，凝集，出现了核固缩、核溶解；胞质消失；可见嗜酸性细胞（Fig. 4B）。缺血 2 周组海马 CA1 区神经细胞形态及数目与正常组相比，无明显差别（Fig. 4C），表现神经细胞排列整齐，细胞大小形态正常。

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硕士论文
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本文编号：3364986