Her2/neu基因沉默对脑膜瘤细胞增殖的影响

发布时间：2021-08-27 16:29

　　目的：1.搜集人脑膜瘤术后标本进行原代培养并鉴定。2. Her2siRNA慢病毒转染人脑膜瘤细胞，观察转染前后细胞的增殖活性和生物学行为的改变。方法：1.在神经外科术后搜集新鲜的脑膜瘤组织，经过原代和传代培养后获得的脑膜瘤细胞，在对数生长期用免疫组化法和FISH法对其进行鉴定。2.将Her2siRNA慢病毒载体转染到人脑膜瘤细胞中，倒置显微镜在1-4天4个时间点观察病毒的表达，确定最佳感染复数（MOI）。3.实验分为三组：①Control组：用含10-15%血清的DMEM培养基培养人的脑膜瘤细胞；②M ock组：感染空载体的脑膜瘤细胞；③Her2siRNA组：感染了Her2siRNA慢病毒的脑膜瘤细胞。4.慢病毒感染72小时后，用CCK-8法检测各组脑膜瘤细胞的增殖抑制率；同时应用RT-PCR法检测Her2/neu基因的表达情况；Western blot法检测Her2、VEGF和Ki-67蛋白的表达情况。5.将各组细胞接种至裸鼠腋下检测成瘤情况。结果：1.搜集新鲜的人脑膜瘤术后标本，进行原代培养，在10%DMEM培养基培养下，贴壁后呈多角形生长。2.由上海汉恒股份有限公司建立Her2s... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

人脑膜瘤细胞生长特点（A:×200B:×200）

图 3-2 人脑膜瘤细胞免疫组化的表达（EMA:×200 Vim:×200）Fig.3-2 human meningioma cells expression in immunohistochemistry（EMA:×200 Vim:×200）2.2 人脑膜瘤组织的 FISH 检测切片上橘红色信号代表 Her2 的基因信号，绿色信号代表 17 号染色体着丝粒

代表 Her2 的基因信号，绿色信号代表 挑选，20-30 个肿瘤细胞核的双色信号号总数比值≥2.2、部分区域众多信号连扩增；若部分区比值介于 1.8-2.2 之间，（如图 3-3）。

【参考文献】：
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本文编号：3366699