胶质母细胞瘤细胞系中FRAT1与血管新生关系的研究

发布时间：2021-08-30 21:10

　　目的:胶质瘤是一种起源于神经胶质细胞或前体细胞的中枢神经系统（central nervous system,CNS）肿瘤,分别占所有原发性CNS肿瘤的25.5%和恶性肿瘤的80.8%,其中最常见、恶性程度和致死性最高的原发性肿瘤是多形性胶质母细胞瘤（glioblastoma multiforme,GBM）,虽然近年来对GBM的治疗取得了很大的进展,但是患者的预后依旧不乐观。在GBM中,血管新生对疾病的发展以及预后有重要意义,它是实质肿瘤生长和转移的必要条件。作为血管新生最主要的调节因子,血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）是治疗血管新生疾病的重要靶标。贝伐单抗是靶向VEGF的单克隆抗体,已经被美国食品药物管理局（Food and Drug Administration,FDA）批准用于治疗复发性GBM。但是在临床应用中,贝伐单抗只能延长患者的无进展生存期,却对总生存期的改善没有明显效果。寻找新的标志物并采用联合治疗方案可能会改善GBM患者的治疗效果。研究表明Wnt/β-catenin信号通路在生理性和病理性的血管新生过程中发... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

U251细胞中FRAT1mRNA的表达水平

山西医科大学硕士学位论文13测U251细胞上清液中VEGF的浓度，如图2-2-C所示，与siNC组进行对比，siFRAT1组U251细胞上清液中VEGF的浓度明显降低（P<0.001），这一结果与Westernblot和real-timePCR实验的结果相一致。这些结果表明敲低FRAT1可显著抑制U251细胞中VEGF的表达。图2-2siNC/siFRAT1U251细胞中VEGF的表达水平。采用Westernblot、real-timePCR以及ELISA技术进行检测，图A示siFRAT1组VEGF蛋白的表达水平较siNC组明显降低；图B示siFRAT1组VEGFmRNA的表达水平较siNC组明显减少（**P<0.01）；图C示U251细胞上清液中VEGF的浓度在siFRAT1组中较siNC组显著降低（***P<0.001）。2.3内皮细胞成管实验证实敲低FRAT1可抑制HUVECs的血管新生能力在手术切除的人脑胶质瘤组织中，FRAT1的表达与血管新生呈正相关[23]。说明FRAT1可能在胶质瘤组织中参与血管新生的调节，但是目前尚没有针对这两个因子的相关研究。在本研究中，通过内皮细胞成管实验来检测FRAT1的下调是否会影响HUVECs的成管能力。将siNC/siFRAT1U251细胞中收集的上清液作为HUVECs的培养基培养6小时，然后检查细胞成管情况（图2-3）。图2-3-A示siFRAT1组细胞的上清液明显抑制了HUVECs的成管能力；图2-3-B示siFRAT1组HUVECs的相对管腔长度较siNC组显著减少（P<0.01）。这些结果表明敲低U251细胞中FRAT1的表达可显著抑制HUVECs的血管新生。

山西医科大学硕士学位论文14图2-3收集U251细胞的上清液培育HUVECs进行内皮细胞成管实验。HUVECs在上清液中培育6h后检测成管能力，图A示siFRAT1组内皮细胞的管样结构较siNC组明显减少；图B示2组样本中管样结构的相对长度，siFRAT1组较siNC组明显降低（**P<0.01）。


本文编号：3373509