siRNA干扰人脑源性神经营养因子表达对U251细胞凋亡作用机制研究
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【摘要】：目的应用特异性脑源性神经营养因子-小干扰核糖核酸(brain derived neurotrophic factor-small interfering RNA,BDNF-si RNA)下调U251细胞中BDNF表达,观察对胶质瘤细胞凋亡的影响,并初步探讨其相关机制。方法将经体外培养的人胶质瘤细胞系U251细胞按照随机数方法随机分为3组,其中A组为对照组,B组为non-silencing-si RNA组,C组为BDNF-si RNA组,取对数生长期的胶质瘤U251细胞用于本研究。通过Western blot法检测细胞BDNF、AKt、p AKt蛋白的表达情况,ELISA检测各组BDNF的分泌水平,流式细胞术检测各组U251细胞凋亡情况。结果用non-silencing-si RNA和BDNF-si RNA分别瞬时转染U251细胞后,Western blot可见C组与A、B两组相比,BDNF、p AKt蛋白表达明显降低,且差异有统计学意义(P㩳0.05);A组和B组相比,差异无统计学意义。ELISA提示C组U251细胞培养上清中BDNF含量为(70.20±3.05)pg/ml,与A、B两组相比有所降低,且有统计学意义(P㩳0.05);A、B两组相比未见明显差异。流式细胞术检测结果可见C组细胞的凋亡率为(19.62±2.50)%,这与A组(1.63±0.61)%和B组(1.78±0.94)%相比明显增高,且差异有统计学意义(P㩳0.05);A、B两组相比,差异无统计学意义。结论人脑源性神经营养因子(BDNF)具有促进胶质瘤细胞存活和抗凋亡的能力。人胶质瘤细胞系U251细胞体外培养时,特异性BDNF-si RNA能够显著降低U251细胞BDNF、p AKt表达,同时,干扰BDNF表达能促进U251细胞的凋亡,研究推测这与Trk B-Akt通路密切相关,其具体的机制需要后续的进一步研究。
【关键词】：siRNA BDNF U251 凋亡
【学位授予单位】：辽宁医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.41
【目录】：
- 中文论著摘要4-6
- 英文论著摘要6-8
- 英文缩略语表8-9
- 前言9-10
- 实验材料与方法10-13
- 结果13-14
- 讨论14-16
- 结论16-17
- 本研究创新的自我评价17-18
- 参考文献18-21
- 附图21-22
- 附录22-34
- 一、文献综述22-31
- 参考文献28-31
- 二、在学期间科研成绩31-32
- 三、致谢32-33
- 四、个人简介33-34
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本文编号：337493
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