干细胞相关基因MSI在人脑胶质瘤中的表达及功能研究

发布时间：2021-09-01 00:13

　　胶质瘤是最为常见的中枢神经系统肿瘤,约占全部脑肿瘤的一半以上,其起源于神经胶质细胞。所有胶质瘤生物学行为上都呈恶性表现,低级别胶质瘤生长缓慢,复发进展慢,而高级别胶质瘤具有生长快、弥散性侵袭、复发快,进展迅速,放化疗易耐受抵抗等特点,尽管目前以手术为主的综合治疗如放射外科治疗、术后放疗、化疗和免疫治疗等已有了长足的进步,高级别胶质瘤患者的预后仍较差,至今没有取得实质性进展。目前认为胶质瘤的发生发展是一个多因素参与、多步骤的复杂生物学过程,与基因突变关系密切,是多基因参与的基因网络失衡引起的。肿瘤干细胞（tumor stem cells,TSCs）学说的提出为肿瘤的治疗提供新的希望：肿瘤细胞群体中只有极少数的细胞具有干细胞特点,能无限增殖并能自我更新维持干细胞库的稳定,这种肿瘤干细胞在肿瘤的发生、进展和复发中发挥着关键根源性作用。如果治疗只杀灭了肿瘤细胞中不具备无限增殖能力的非干性细胞,而肿瘤干细胞存活下来,那么这部分肿瘤干细胞势必继续增殖分化形成新的复发灶,导致肿瘤的复发。因此,肿瘤治疗的成败主要取决于其中的肿瘤干细胞的清除。胶质瘤是最早鉴定并分离出肿瘤干细胞的肿瘤之一,脑肿瘤干细胞（... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：137 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
縮略语全称
前言
第一章 Musashi家族基因在人脑胶质瘤中的表达
    第一节 材料和方法
        1. 材料
        2 方法
    第二节 实验结果
        1. RNA质量检测
        2. RT-PCR检测Musashi家族基因在人脑胶质瘤组织中的表达情况
        3. Musashi家族基因在人胶质瘤细胞系中的表达
        4. 星形细胞瘤组织标本HE染色及组织芯片的制作
        5、MSI1和MSI2蛋白在正常脑组织和星形细胞瘤中的表达及定位
        6、MSI1和MSI2蛋白的表达与其他肿瘤干细胞标志关系
        7. 胶质瘤细胞系肿瘤干细胞的培养及鉴定
        8. Musashi基因在胶质瘤细胞系及其肿瘤球干细胞中的表达差异
    第三节 分析与讨论
    第四节 小结
第二章 Musashi家族基因在胶质瘤中的功能研究
    第一节 材料和方法
        1. 材料
        2. 方法
    第二节 实验结果
        1. si-RNA干扰MSI1和MSI2的特异性靶位选择
        2. sh-MSI-慢病毒载体构建
        3. 慢病毒滴度测定
        4. 慢病毒感染U251细胞
        5. 慢病毒感染后MSI基因表达下调
        6. MSI基因表达下调对细胞增殖的影响
        7. MSI基因表达下调对细胞周期的影响
        8. MSI基因下调对细胞凋亡的改变
        9. 体外划痕实验检测细胞运动能力
        10. 迁移实验检测细胞的运动迁移能力
        11. 侵袭实验
        12. 平板克隆形成实验
        13. 肿瘤球形成能力
    第三节 分析与讨论
        1. RNA干扰
        2. MSI基因与胶质瘤细胞的增殖能力
        3. MSI抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭
        4. MSI基因与胶质瘤细胞凋亡
        5. MSI基因与胶质瘤细胞肿瘤球的形成能力
    第四节 小结
第三章 Musashi2基因作用机制的初步研究
    第一节 材料和方法
        1. 材料
        2 方法
    第二节 实验结果
        1. 免疫组织化学检测β-catenin表达
        2. MSI2基因沉默后β-catenin的表达
        3. MSI2沉默后Dkk1的表达
    第三节 分析与讨论
    第四节 小结
参考文献
综述
    参考文献
博士期间发表论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]RNA干扰是静止基因表达的新方法[J]. 胡晓霞.  中国实验血液学杂志. 2005(06)



本文编号：3375887