脑苷肌肽对大鼠脑出血后TNF-α，MMP-9，TIMP-1干预的实验性研究

发布时间：2017-05-01 14:02

  本文关键词：脑苷肌肽对大鼠脑出血后TNF-α，MMP-9，，TIMP-1干预的实验性研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:经过大鼠尾状核脑出血模型的建立,同时给予脑苷肌肽干预,观察脑苷肌肽对脑出血继发性脑损伤中炎性因子(TNF-α)、脑水肿相关因子(MMP-9、TIMP-1)的影响,探讨脑苷肌肽对脑出血后继发性脑损伤中炎症反应、脑水肿的影响及其保护作用。方法:1.采用立体定位技术,将50ul大鼠自体鼠尾不凝血注射入大鼠脑尾状核,建立大鼠脑出血模型。2.80只SD大鼠被随机分为四组:对照组、ICH组、小剂量治疗组、大剂量治疗组;对照组5只,ICH组及大、小剂量治疗组每组各25只;每组采取5个时间点观察:术后6h、24h、48h、72h和5d,每个时间点选用5只大鼠。3.给药方式:向大鼠腹腔内注射脑苷肌肽,小剂量治疗组按3.15ml/Kg给药,大剂量治疗组按5.25ml/Kg给药,首次给药时间为术后2小时,之后每24小时1次,首次给药量加倍。对照组及ICH组同一时间点给予同等剂量生理盐水。4.术后2h对脑出血模型进行评价,确定模型是否成功,在拟定的各个时间点对成功模型进行神经功能障碍评分。5.运用免疫组化、图像分析技术来观察并量化TNF-α,MMP9,TIMP-1在各个时间点的变化情况。6.HE染色观察脑组织血肿周围神经细胞,炎性细胞及脑组织变化情况。结果:1.神经功能障碍:对照组无明显神经功能障碍(P0.05),ICH组及治疗组与对照组相比,手术后2h时间点有明显神经功能障碍(P0.05);大小剂量治疗组和ich组相比,手术后2h及6h时间点神经功能障碍无明显差异(p0.05),但二者神经功能障碍在24h、48h、72h以及5d时间点相比有明显差异(p0.05);大剂量与小剂量治疗组相比,神经功能障碍在24h、48h、72h以及5d时间点有明显差异(p0.05),在6h时间点神经功能障碍无明显差异(p0.05)。2.脑组织含水量:对照组脑组织含水量在各个时间点无明显差异(p0.05);ich组脑组织含水量在术后6h、24h、5d与72小时时间点比较有明显差异(p0.05);ich组和治疗组与对照组相比,脑组织含水量在各个时间点均有增加(p0.05);治疗组与ich组相比,在24h、48h、72h及5d脑组织含水量有明显减少(p0.05);大剂量与小剂量治疗组相比,在24h、48h、72h及5d脑组织含水量有明显减少(p0.05)。3.tnf-α表达数量:对照组tnf-α的数量有少量表达;ich组tnf-α表达的数量在6h、24h、48h、5d与72h比较有统计学差异(p0.05);ich、治疗组与对照组相比,tnf-α表数量在各个观察点有所增加(p0.05);治疗组与ich组各个观察点相比,tnf-α表达数量有所减少(p0.05);大剂量与小剂量治疗组相比,各个观察点tnf-α表达数量有所减少(p0.05)。4.mmp-9表达数量:ich组及治疗组与对照组相比,mmp-9表达数量在各个观察点有明显差异(p0.05);ich组mmp-9阳性表达数在6h、24h、72h、5d与48h相比,具有明显差异(p0.05);大小剂量治疗组与ich组相比,mmp-9表达数量在各个观察点均有减少(p0.05);大剂量与小剂量治疗组相比,mmp-9表达数量在各个观察点均减少(p0.05)。5.timp-1表达数量:ich组与对照组相比,timp-1表达数量在各个观察点具有明显差异(p0.05);ich组timp-1表达数量在6h、24h、48h、5d与72h相比,具有明显差异(p0.05);大小剂量治疗组与ICH组相比,TIMP-1表达数量在各个观察点有所增加(P0.05);大剂量与小剂量治疗组相比,TIMP-1表达数量在各个观察点有所增加(P0.05);6.HE染色:ICH组在术后各个观察点,可以看到血肿周围组织充血水肿明显,其中大量白细胞浸润,神经元变性坏死;随着术后时间点的延长,血肿周围组织中的胶质细胞显著增多,脑水肿在3d后开始减轻。治疗组与ICH组相比,细胞及组织充血水肿相对较轻,炎症细胞的浸润明显减少。大剂量与小剂量治疗组相比,脑水肿减轻更为明显。结论:1.采用自体不凝血注入法制作大鼠模型方法简单,易操作。该脑出血模型与人体脑出血的病理生理变化较接近,为一种比较理想的研究脑出血的动物模型。2.脑出血血肿周围组织中TNF-α、MMP-9明显增多,可能参与脑出血后脑水肿、炎症损伤。3.脑出血后血肿周围组织TIMP-1明显升高,可能对脑出血后脑水肿及炎症反应有保护作用。4.脑苷肌肽可能通过减少TNF-α、MMP-9表达以及白细胞浸润;增加TIMP-1的表达,从而对脑出血后脑水肿及炎症反应有保护作用。
【关键词】：脑苷肌肽 脑出血 TNF-α TIMP-1 MMP-9
【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R743.34
【目录】：

• 中文摘要3-6
• 英文摘要6-10
• 前言10-13
• 材料与方法13-19
• 结果19-29
• 讨论29-35
• 结论35-40
• 参考文献40-44
• 英汉缩略词对照表44-45
• 致谢45-46
• MMP9,TIMP-1 的生物学活性及其在脑出血中的作用(综述)46-59
• 参考文献52-59

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本文编号：339027