RNAi抑制miR-221对人脑胶质瘤细胞生长影响及机制研究

发布时间：2021-09-17 12:27

　　第一部分人脑胶质瘤中miR-221和p27的表达及临床意义【目的】探讨miR-221在胶质瘤中的表达及其与p27的关系。【方法】收集不同病理级别胶质瘤标本,以荧光定量PCR法和免疫印迹法检测其中miR-221及p27的表达,分析其与胶质瘤病理级别的关系。【结果】 miR-221的表达强度与肿瘤恶性程度呈正相关,与p27的表达呈负相关。【结论】 miR-221的过表达和p27的表达下降或缺失与胶质瘤,尤其是恶性胶质瘤的发生、发展密切相关。第二部分靶向miR-221siRNA慢病毒表达载体的构建和鉴定【目的】构建靶向miR-221的siRNA慢病毒表达载体,为研究RNAi在哺乳动物细胞内抑制靶基因表达奠定基础。【方法】根据siRNA靶点设计的原则运用相关软件设计靶序列并合成其表达框,连接入siRNA表达质粒pGCSIL-GFP,同时构建miR-221表达载体pEGFP-miR-221,共同转染293T细胞,Western blot检测转染后293T细胞中Flag蛋白表达,间接反映各靶序列抑制效率。【结果】重组质粒经测序鉴定证明各转录模板完整、正确插入到相应质粒中,并筛选出1号靶序列对miR... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：85 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

不同级别胶质瘤中miR-221的表达

南京医科大学博士学位论文18=9.698 , P =0.006)(图2) 。图2 不同级别胶质瘤中的p27表达三、miR-221与p27的关系进一步分析miR-221与p27表达之间的关系发现两者间存在一个负指数关系,即p27=0.2558×0.9143miR-221(图3)。而且miR-221与p27的表达量与患者的年龄、性别无相关性。

miR-221与p27的表达关系

【参考文献】：
期刊论文
[1]Gene expression regulators——MicroRNAs[J]. &YIN,Q.James.  Chinese Science Bulletin. 2005(13)
[2]慢病毒载体构建及结构优化[J]. 李振宇.  国外医学(分子生物学分册). 2002(05)



本文编号：3398724