白藜芦醇通过SIRT1/AMPK信号通路减轻MPTP诱导的小鼠多巴胺能神经元丢失

发布时间：2021-09-23 02:18

　　目的观察白藜芦醇（RV）对帕金森病（PD）小鼠的神经保护作用,并探索其发挥神经保护作用的可能机制。方法将48只小鼠随机分为CON组、MPTP组、RV+MPTP组和EX527+RV+MPTP组,每组12只。腹腔注射MPTP建立PD小鼠模型,并给予RV灌胃、SIRT1特异性抑制剂EX257腹腔注射处理,利用免疫荧光、western blot等检测相关蛋白表达。结果给予RV后,与MPTP组相比,RV+MPTP组SIRT1蛋白表达显著增加（P<0.001）,p-AMPK蛋白水平显著升高（P<0.01）,Cleaved caspase 3蛋白水平显著下降（P<0.01）,小鼠黑质区TH阳性神经元丢失率明显降低,纹状体组织中TH蛋白表达显著增加（P<0.01）。给予EX527后,阻断了RV的上述作用,p-AMPK蛋白水平显著降低（P<0.01）,Cleaved caspase 3显著升高（P<0.01）,小鼠黑质区TH阳性神经元丢失率明显升高,纹状体组织中TH蛋白表达显著下降（P<0.001）。结论 RV可能通过激活SIRT1/AMPK信号通路,SIRT1... 

【文章来源】：国际神经病学神经外科学杂志. 2016,43(02)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

免疫荧光示小鼠黑质区TH阳性神经元

2．2小鼠纹状体组织中TH、SIＲT1蛋白表达变化与黑质区免疫荧光结果类似，与CON组相比，MPTP组小鼠纹状体组织中TH蛋白显著下降(P＜0．001)。给予ＲV后，TH蛋白较MPTP组显著升高(P＜0．01)。给予特异性SIＲT1抑制剂EX527后，TH蛋白较ＲV+MPTP组显著下降(P＜0．001)。对各组小鼠纹状体区SIＲT1蛋白表达进行检测，结果与各组中TH蛋白表达变化一致。见图2。图2小鼠纹状体组织中TH、SIＲT1蛋白的表达。A:小鼠纹状体组织中TH蛋白Westernblot图谱。B:TH与GAPDH灰度比统计图。C:小鼠纹状体组织中SIＲT1蛋白Westernblot图谱。D:SIＲT1与GAPDH灰度比统计图。*P＜0．05、＊＊P＜0．01、＊＊＊P＜0．001，均为与CON组比较;#P＜0．05、##P＜0．01、###P＜0．001，均为与MPTP组比较;$P＜0．05、$$P＜0．01、$$$P＜0．001，均为与ＲV+MPTP组比较。2．3小鼠纹状体组织中AMPK、p-AMPK蛋白表达变化与CON组相比，MPTP组小鼠纹状体组织中SIＲT1蛋白表达显著减少(P＜0．01)的同时，p-AMPK蛋白水平显著下降(P＜0．05)。给予ＲV后，SIＲT1蛋白表达显著增多(P＜0．001)的同时，p-AMPK蛋白水平较MPTP组亦显著升高(P＜0．01)。给予特异性SIＲT1抑制剂EX527后，SIＲT1蛋白表达较ＲV+MPTP组显著减少(P＜0．001)，与此同时，p-AMPK蛋白水平也较ＲV+MPTP组显著下降(P＜0．01)。AMPK蛋白表达在各组之间无显著差异。这提示激活或抑制SIＲT1影响AMPK磷酸化水平。见图3。2．4小鼠纹状体组织中Caspase3、Cleavedcaspase3蛋白表达变化与CON组相比，MPTP组小鼠纹状体组织中Cleavedcaspase3蛋白水平显著升高(P＜0．001)。与MPTP组相比，ＲV+MPTP组Cleavedcaspase3蛋白水平显著下降(P＜0．01)。给予特异性SIＲT1抑制剂EX527后，与

图3小鼠纹状体组织中AMPK、p-AMPK蛋白的表达。A:小鼠纹状体组织中AMPK、p-AMPK蛋白Westernblot图谱。B:AMPK、p-AMPK与GAPDH灰度比统计图。*P＜0．05、＊＊P＜0．01、＊＊＊P＜0．001，均为与CON组比较;#P＜0．05、##P＜0．01、###P＜0．001，均为与MPTP组比较;$P＜0．05、$$P＜0．01、$$$P＜0．001，均为与ＲV+MPTP组比较。图4小鼠纹状体组织中Caspase3、Cleavedcaspase3蛋白的表达。A:小鼠纹状体组织中Caspase3、Cleavedcaspase3蛋白Westernblot图谱。B:Caspase3、Cleavedcaspase3与β-actin灰度比统计图。*P＜0．05、＊＊P＜0．01、＊＊＊P＜0．001，均为与CON组比较;#P＜0．05、##P＜0．01、###P＜0．001，均为与MPTP组比较;$P＜0．05、$$P＜0．01、$$$P＜0．001，均为与ＲV+MPTP组比较。3讨论PD是中老年人中常见的神经变性疾病［15，16］。迄今为止，PD的发病机制尚未完全阐明，临床常用的多巴胺制剂仅能缓解运动症状，研究基于分子信号机制的延缓或改变PD病程进展的神经保护治疗具有重要的临床意义和科学前景［17］。本研究结果证实，ＲV对MPTP帕金森病小鼠多巴胺能神经元具有保护作用，且该保护作用与激活SIＲT1/AMPK信号通路有关。AMPK是能量代谢的关键调节因子，因其活性受AMP/ATP比值调控，被称作细胞的“代谢传感蛋白”或“能量监测器”，AMPK通过调节自噬和蛋白降解等稳态机制来控制体内的代谢平衡，维持细胞能量供求平衡［5］。在热量限制的情况下，NAD+依赖的去乙酰化酶SIＲT1水平升高，进而延长生物体的衰老过程，因此，SIＲT1与细胞的能量代谢同样存在着密切的关系［18，19］。这提示AMPK与SIＲT1可能在调节能?


本文编号：3404830