基因沉默精氨酰—tRNA合成酶减轻大脑皮层缺血性损伤的研究

发布时间：2021-09-29 01:32

　　目的:有学者已经报道在缺氧性损伤之前或之后基因沉默精氨酰-tRNA合成酶可使秀丽隐线虫免于死亡,然而还没有关于将基因沉默精氨酰-tRNA运用于哺乳动物的缺血性卒中,其对缺血性脑损伤的保护体机制亦不清楚,在本实验中,我们研究了编码精氨酰-tRNA合成酶的Rars基因,并检测了沉默Rars基因在永久性大脑中动脉阻塞中的效果。方法:为了实现这一目标,在成年雄性SD大鼠右侧大脑皮层注射shRNA腺病毒颗粒,以沉默产生精氨酰-tRNA合成酶的Rars基因,并以空病毒载体或磷酸盐缓冲液为对照组。四天后,对大鼠实施永久性大脑中动脉闭塞处理,并检测大鼠右侧大脑皮层腺病毒注射区域精氨酰-tRNA合成酶水平的变化,通过检测永久性大脑中动脉闭塞后第一天和第三天梗死体积、氧化应激、血脑屏障、线粒体功能、葡萄糖代谢的变化,评价基因沉默精氨酰-tRNA合成酶对缺血性脑损伤的的影响。结果:注入大鼠大脑皮层的shRNA腺病毒成功地抑制了大鼠大脑皮质精氨酰-tRNA合成酶的表达。我们观察到,与对照组相比,基因沉默精氨酰-tRNA合成酶后,缺血大脑皮层的抗氧化应激能力、线粒体功能和葡萄糖利用率均得到改善,而梗死体积并没有... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
英文缩略词
第1章 前言
第2章 实验材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验设备与仪器
        2.1.3 实验试剂
        2.1.4 实验相关抗体
        2.1.5 实验溶液的配置
    2.2 实验方法
        2.2.1 实验分组
        2.2.2 重组腺病毒立体定向注射
        2.2.3 大鼠大脑中动脉梗塞模型(MCAO)
        2.2.4 神经功能缺损评分
        2.2.5 TTC染色
        2.2.6 RT-PCR法检测检测基因表达
        2.2.7 Western blot检测蛋白表达水平
        2.2.8 免疫荧光染色
        2.2.9 氧化应激测定
        2.2.10 ROS含量测定
        2.2.11 ATP含量测定
        2.2.12 核磁共振（MRI）
        2.2.13 透射电镜（TEM）
        2.2.14 18F-FDG小动物PET成像
    2.3 数据分析
第3章 结果
    3.1 重组腺病毒可有效抑制ArgRS的表达
    3.2 基因沉默ArgRS可改善缺血后神经功能,但未能减少梗死体积
    3.3 基因沉默ArgRS减轻缺血后脑水肿
    3.4 基因沉默ArgRS减轻缺血后神经细胞损伤
    3.5 基因沉默ArgRS增强了脑缺血损伤后的抗氧化活性
    3.6 基因沉默ArgRS减轻了脑缺血诱导的线粒体功能障碍
    3.7 基因沉默ArgRS减轻了脑缺血对血脑屏障的损伤
    3.8 基因沉默ArgRS可促进缺血损伤后葡萄糖的利用
第4章 讨论
参考文献
致谢
攻读硕士期间研究成果
附图
综述
    参考文献



本文编号：3412939