DCX和SPARC共表达影响脑胶质瘤U-87MG细胞放射敏感性及其机制研究

发布时间：2021-10-15 06:12

　　目的：本课题主要通过构建双启动子介导的DCX和SPARC双基因共表达重组腺病毒载体（Ad-DCX-SPARC）并转染脑胶质瘤U-87MG细胞，探讨DCX和SPARC双基因对于U-87MG细胞生长、侵袭及放射敏感性的影响及其可能的作用机制，为胶质瘤基因治疗及其联合放疗提供理论依据。方法：构建Ad-DCX-SPARC重组腺病毒载体；用激光共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达、流式细胞仪检测表达GFP的细胞比例确定重组腺病毒对U-87MG细胞的最佳感染剂量；RT-PCR和Western blot法检测DCX和SPARC在U-87MG细胞mRNA和蛋白水平的表达；采用MTT法检测DCX和SPARC共表达（DCX-SPARC）及联合X线对胶质瘤U-87MG细胞生长的影响；Transwell实验观察DCX-SPARC对U-87MG细胞侵袭能力的影响；采用克隆形成法计数转染Ad-DCX-SPARC及联合X线照射的U-87MG细胞克隆形成率；流式细胞仪检测DCX-SPARC对X线诱导的细胞凋亡及细胞周期分布的影响；Western blot法分析凋亡相关蛋白Bad、Bax、Bcl-2和侵袭相关蛋... 

【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

pAdTrack-CMV转移载体示意图

DCX和SPARC双基因的连接方式示意图

PCRDCX和SPARC基因的琼脂糖凝胶电泳结果


本文编号：3437569