LINC01296调控Wnt/β-catenin信号通路影响SK-N-SH细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭

发布时间：2021-10-16 13:08

　　该研究探讨长链非编码RNA LINC01296（lncRNA LINC01296）是否通过调控Wnt/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路而调节人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH增殖、凋亡、迁移及侵袭。采用qRT-PCR法检测神经母细胞瘤组织与瘤旁组织中LINC01296的表达水平;体外培养SK-N-SH细胞,随机分为Control组（正常培养SK-N-SH细胞）、si-NC组（si-NC转染至SK-N-SH细胞）、si-LINC01296组（si-LINC01296转染至SK-N-SH细胞）、LiCl组（Wnt/β-catenin信号通路激活剂处理SK-N-SH细胞）、si-LINC01296+LiCl组（si-LINC01296与LiCl共同处理SK-N-SH细胞）;采用甲基噻唑基四唑（MTT）与克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67（Ki67）、神经型钙黏蛋白（N-cadherin）、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）、... 

【文章来源】：中国细胞生物学学报. 2020,42(12)CSCD

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料与试剂
        1.1.1 一般资料
        1.1.2 细胞与试剂
    1.2 方法
        1.2.1 实验分组
        1.2.2 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中LINC01296的表达水平
        1.2.3 MTT检测细胞增殖
        1.2.4 平板克隆形成实验
        1.2.5 Transwell实验检测细胞迁移与侵袭
        1.2.6 流式细胞术检测细胞凋亡率
        1.2.7 蛋白免疫印迹(Western blot)检测Wnt1、β-catenin、Ki67、N-cadherin、E-cadherin、cleaved-caspase3蛋白表达
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 qRT-PCR检测LINC01296在各个分组处理的SK-N-SH中的表达
    2.2 MTT法检测各个分组处理的SK-N-SH细胞活性
    2.3 克隆形成实验检测各个分组处理的SK-N-SH克隆形成数
    2.4 Tranwell检测各个分组处理的SK-N-SH迁移侵袭数
    2.5 流式细胞检测各个分组处理的SK-N-SH凋亡率
    2.6 各个分组处理的SK-N-SH中Wnt/β-catenin信号通路的表达
    2.7 Western检测各个分组处理的SK-N-SH中Ki67、E-cadherin、N-cadherin、cleaved-caspase3蛋白的表达
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]lncRNA MAGI2-AS3调控Fas/FasL通路抑制神经母细胞瘤的生长[J]. 黄垂名,张小波,彭小旅.  中国免疫学杂志. 2019(16)
[2]miR-183调控Wnt/β-catenin信号通路影响胃癌SGC-7901细胞生物学特性的研究[J]. 张希成,沈金根,贾正我,钱丽芬,孙元龙.  世界华人消化杂志. 2019(13)
[3]长链非编码RNA PTV1通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制甲状腺癌细胞的增殖、侵袭及诱导凋亡[J]. 钟丽颖,李顺东,孙叶海.  成都医学院学报. 2019(04)
[4]年龄及血清神经元烯醇化酶在中、高危神经母细胞瘤病理预后分型中的预测价值[J]. 杨深,蔡思雨,马晓莉,秦红,韩炜,彭晓霞,王焕民.  中华实用儿科临床杂志. 2018 (15)
[5]β-榄香烯诱导神经母细胞瘤细胞凋亡及其机制[J]. 杨燕,何晓燕,王珊,邹琳,章均,彭亮,吕麟亚.  免疫学杂志. 2018(06)
[6]山柰酚通过Wnt/β-catenin信号通路抑制HBx-HepG2细胞增殖、侵袭及迁移[J]. 黄茂莘,陈玲,韩鹏定,林诗可.  中国病理生理杂志. 2017(08)
[7]汉黄芩素对胃癌细胞SGC7901凋亡、侵袭迁移及Wnt/β-catenin信号通路的影响研究[J]. 汪晓辉,卫莹芳,程红.  中药材. 2016(06)

硕士论文
[1]激活Notch1和Wnt/β-catenin信号通路对人胃癌细胞BGC-823增殖的影响[D]. 默娟.辽宁医学院 2012



本文编号：3439862