经尾静脉注射移植人脐带间充质干细胞治疗大鼠缺血性脑卒中的实验研究

发布时间：2021-10-23 18:35

　　目的：体外培养原代人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUMSCs）,并对其进行传代扩增,观察及鉴定其生物学特性,经尾静脉注射移植hUMSCs治疗缺血性脑卒中,探讨其作用机理并且提供理论依据及实验基础。方法：取足月妊娠健康新生儿脐带,PBS充分冲洗,剔除脐带血管及羊膜,将华通胶（Wharton’s jelly）剪碎至1mm3大小,将组织植入培养皿中,在含有10%胎牛血清（fetal bovine senun,FBS）、10ng/ml碱性成纤维生长因子的DMEM/F12中培养,观察细胞形态变化,细胞融合至80%-90%后原代细胞培养完成,进行消化传代。收集P5代细胞,流式细胞仪检测细胞表面表型,包括FITC-CD29、FITC-CD44、FITC-CD34、FITC-CD45、FITC-CD105、 CD106、FITC-HLA-DR等,并以FITC标记的二抗IgG作为同型对照。动物模型：选取左侧大脑中动脉栓塞再灌注模型（Middle Cerebral Artery Occlusion, MCAO）,选取重量250-... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
目录
第一章 人脐带间充质干细胞的体外扩增培养及鉴定
    1.1 前言
    1.2 材料
        1.2.1 主要试剂
        1.2.2 实验设备
    1.3 实验方法
        1.3.1 hUMSCs的原代培养
        1.3.2 hUMSCs的培养扩增
        1.3.3 hUMSCs表面分子标记检测
        1.3.4 hMSCs细胞的冻存
        1.3.5 复苏
    1.4 结果
        1.4.1 细胞形态学观察
        1.4.2 hUMSCs表面分子表达特征
        1.4.3 hUMSCs复苏
    1.5 讨论
    1.6 小结
第二章 人脐带间充质干细胞移植治疗大鼠脑梗死的实验研究
    2.1 前言
    2.2 实验动物
    2.3 方法
        2.3.1 实验动物分组
        2.3.2 术前准备
        2.3.3 手术过程
        2.3.4 再灌注
        2.3.5 实验模型标准
        2.3.6 脑梗死判定
        2.3.7 细胞移植
        2.3.8 移植后mNSS评分
        2.3.9 脑组织内移植细胞观察
        2.3.10 统计学方法
    2.4 结果
        2.4.1 大鼠造模后神经病学观察
        2.4.2 MRI检查
        2.4.3 TTC染色
        2.4.4 CM-Dil标记细胞
        2.4.5 移植后大鼠行为观察及神经功能评分
        2.4.6 荧光染色
    2.5 讨论
    2.6 小结
附图
附表
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3453688