lncRNA-MALAT1调控ERK/MAPK信号通路抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭的实验研究
发布时间:2021-10-29 04:46
研究目的:胶质瘤是成人最常见的脑肿瘤之一,同时也是死亡率最高的恶性肿瘤之一。尽管术后给予规范的个体化放疗和化疗等综合治疗,但由于其快速增殖、具有高度侵袭潜能及对放疗、化疗的耐受,胶质瘤患者的预后仍较差,其中多形性胶质母细胞瘤的平均生存期只有14.6个月。越来越多的证据表明,长链非编码RNA(lncRNA)的异常表达与恶性肿瘤的发生、发展、复发、预后等密切相关。lncRNA是一类长度超过200nt的非编码RNA,通过上调或下调其表达可以在表观遗传学水平、转录水平、转录后水平等影响基因的表达。据报道,lncRNA-MALAT1在多种人类恶性肿瘤中存在异常表达,并能通过相关的信号通路发挥致癌基因的作用。然而,关于lncRNA-MALAT1在人脑胶质瘤中的表达水平、功能研究及可能的影响机制的报道极少。因此,我们使用实时荧光定量PCR比较了lncRNA-MALAT1在人脑胶质瘤和非瘤脑组织中的表达差异,随后进一步探索了其对人脑胶质瘤增殖、侵袭能力的影响及相关机制。研究方法:(1)我们收集了苏州大学附属第一医院神经外科2010年3月至2013年4月手术切除的胶质瘤组织标本132例及非瘤脑组织20例...
【文章来源】:苏州大学江苏省 211工程院校
【文章页数】:65 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
中文摘要
Abstract
引言
参考文献
材料与方法
1.主要仪器和产地
2.药品及试剂
3.主要试剂及溶液配制
4.人体胶质瘤标本、细胞系来源
5.细胞培养
6.胶质瘤组织和细胞中总RNA的提取
7.慢病毒的构建与合成
8.REAL-TIME PCR检测LNCRNA-MALAT1在胶质瘤组织中和细胞系中的表达情况
9.WESTERN BLOTTING检测 相关蛋白的表达
10.免疫组化实验检测MMP2、KI-67的表达
11.细胞周期实验
12.TRANSWELL体外侵袭实验
13.明胶酶谱实验
14.构建颅内和皮下裸鼠肿瘤模型
15.统计方法
实验结果
1.正常脑组织及脑胶质瘤标本信息
2.MALAT1在胶质瘤细胞株及胶质瘤组织中的表达
3.MALAT1在人脑胶质瘤细胞株U87和U251中的转染效率
4.MALAT1在体外试验中抑制胶质瘤细胞的增殖
5. 在体内试验中过表达MALAT1抑制胶质瘤细胞的增殖
6.体外试验中过表达或低表达MALAT1对细胞侵袭能力的影响
7.MALAT1在胶质瘤细胞中过表达能抑制ERK/MAPK信号通路活性
讨论
结论
参考文献
综述 LNCRNA的生物学功能
参考文献
攻读学位期间公开发表的文章
中英文缩略词表
致谢
本文编号:3463992
【文章来源】:苏州大学江苏省 211工程院校
【文章页数】:65 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
中文摘要
Abstract
引言
参考文献
材料与方法
1.主要仪器和产地
2.药品及试剂
3.主要试剂及溶液配制
4.人体胶质瘤标本、细胞系来源
5.细胞培养
6.胶质瘤组织和细胞中总RNA的提取
7.慢病毒的构建与合成
8.REAL-TIME PCR检测LNCRNA-MALAT1在胶质瘤组织中和细胞系中的表达情况
9.WESTERN BLOTTING检测 相关蛋白的表达
10.免疫组化实验检测MMP2、KI-67的表达
11.细胞周期实验
12.TRANSWELL体外侵袭实验
13.明胶酶谱实验
14.构建颅内和皮下裸鼠肿瘤模型
15.统计方法
实验结果
1.正常脑组织及脑胶质瘤标本信息
2.MALAT1在胶质瘤细胞株及胶质瘤组织中的表达
3.MALAT1在人脑胶质瘤细胞株U87和U251中的转染效率
4.MALAT1在体外试验中抑制胶质瘤细胞的增殖
5. 在体内试验中过表达MALAT1抑制胶质瘤细胞的增殖
6.体外试验中过表达或低表达MALAT1对细胞侵袭能力的影响
7.MALAT1在胶质瘤细胞中过表达能抑制ERK/MAPK信号通路活性
讨论
结论
参考文献
综述 LNCRNA的生物学功能
参考文献
攻读学位期间公开发表的文章
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致谢
本文编号:3463992
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