沉默Clusterin表达对人脑胶质瘤U87细胞放射敏感性的影响

发布时间：2021-10-29 07:02

　　第一部分：Clusterin基因沉默对人脑胶质瘤U87细胞增殖、凋亡与侵袭性的影响目的：研究通过慢病毒介导的RNA干扰技术沉默簇集蛋白（clusterin，CLU）的基因表达后，人脑胶质瘤U87细胞的增殖、侵袭及凋亡等生物学行为将会受到怎样的影响。方法：设计和合成靶向CLU的shRNA序列，并构建到慢病毒的载体plentilox3.7，包被能成功表达各种shRNA载体的慢病毒。将慢病毒感染人脑胶质瘤U87细胞，Real time-PCR检测CLU、MMP-2和TIMP-2基因mRNA水平，Western Blot技术检测CLU蛋白表达水平；运用MTT法、流式细胞仪Annexin V/PI及Transwell体外侵袭实验法评价检测CLU沉默后，对人脑胶质瘤U87细胞在增殖、凋亡及侵袭能力等方面所造成的影响。结果：特异性针对CLU基因全长mRNA的短发夹RNA（shRNA）在经过慢病毒包装后成功感染U87细胞，并在mRNA和蛋白水平上对CLU基因表达产生了特异性的抑制作用；通过MTT结果证实实验组细胞在sCLU表达受到干扰后，其增殖明显受抑，与各对照组比较，差异具有统计学意义（P<0... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Real-timePCR测sCLU的mRNA表达Fig1-1ExpressionofsCLUonmRNAleveldetectedbyReal-timePCR

Real-timePCR检测sCLUmRNA的表达水平

Western-blot检测sCLU蛋白表达Fig1-3WesternblottinganalysisshowstheexpressionofsCLUprotein

【参考文献】：
期刊论文
[1]RNAi沉默clusterin基因对卵巢癌SKOV3细胞放射敏感性的影响[J]. 黄锣,张幸平,陈诚,罗茜,吴永忠.  重庆医科大学学报. 2011(11)
[2]Clusterin基因沉默对卵巢癌SKOV3细胞增殖与侵袭的影响[J]. 黄锣,罗茜,陈诚,张幸平,吴永忠.  第二军医大学学报. 2011(01)
[3]聚集素在前列腺癌细胞不同周期时相的表达[J]. 李学松,周利群,何志嵩,辛殿琪,那彦群,梁云燕,王代树,郭应禄.  中华泌尿外科杂志. 2006(01)



本文编号：3464193