hUC-MSCs上清液对鱼藤酮刺激SH-SY5Y细胞内质网应激的影响

发布时间：2021-11-03 00:02

　　目的制备鱼藤酮（Rotenone,Rot）刺激人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）的帕金森病（Parkinson’s Disease,PD）体外模型,探讨人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）上清液对PD细胞模型内质网（endoplasmic reticulum,ER）应激的影响。方法PD细胞模型制备:SH-SY5Y细胞置于内含10%（体积分数）灭活胎牛血清、1%双抗的DMEM/F12培养基中,在37℃、5%（体积分数）CO₂恒温箱中培养,每2天换液1次,待细胞长满培养瓶底的80%-90%时,按1:3进行传代培养。设0μmol/L、0.1μmol/L、1.0μmol/L、5.0μmol/L浓度的鱼藤酮处理SH-SY5Y细胞24h,采用CCK-8法检测不同浓度Rot下的细胞活力,Annexin-V/PI染色、流式细胞仪检测不同浓度Rot的细胞凋亡及蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测不同浓度Rot刺激SH-SY5Y细胞的αSyn表达水平,结果用Image J进行条带灰... 

【文章来源】：华北理工大学河北省

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同浓度鱼藤酮刺激SH-SY5Y细胞形态学表现（倒置显微镜×100）

且呈浓度依赖性升高（图3、表 2），且鱼藤酮浓度为 1.0μmol/L 和 5.0μmol/L 时，与空白对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。结果表明：在相同时间内，SH-SY5Y 细胞的凋亡率随鱼藤酮浓度的增大而增加。图 3 不同浓度鱼藤酮培养 SH-SY5Y 细胞 24h 后细胞凋亡率Fig.3 Apoptosis rate of SH-SY5Y cells cultured with different concentrations of rotenone for 24h表 2 不同浓度鱼藤酮刺激 SH-SY5Y 细胞 24h 后，细胞早期凋亡率（ x s）Table 2 Early apoptosis rate of SH-SY5Y cells stimulated by different concentrations of rotenone for24 hours ( )组别（μmol/L） N 细胞凋亡（ ）F P0 3 3.56±0.54 91.495 0.0000.1 3 5.60±0.541.0 3 16.39±1.65*5.0 3 29.541±3.91*注： 1.0μmol/L Rot 组和 5.0μmol/L Rot 组与 0 组相比*P＜0.05。1.2.4 不同浓度鱼藤酮刺激 SH-SY5Y 细胞内 α-synuclein 的表达水平

第 1 章 实验研究蛋白分子量为 17kDa，是 PD 发病过程中标志性错误折t 检测各实验组 αSyn 的表达。结果显示：24h 后，S酮浓度的增大而增多。0.1μmol/L 鱼藤酮组较空白对无统计学意义（P＞0.05）；1.0μmol/L 和 5.0μmol/L4h 后 αSyn 表达较空白对照组相比明显增多，且差异具图 4、表 3）。酮诱导 SH-SY5Y 细胞的帕金森病体外模型，可以得到明显的表达，且在相同时间内，其表达量在一定范围内。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Human umbilical cord blood-derived stem cells and brain-derived neurotrophic factor protect injured optic nerve:viscoelasticity characterization[J]. Xue-man Lv,Yan Liu,Fei Wu,Yi Yuan,Min Luo.  Neural Regeneration Research. 2016(04)
[2]新型PD模型研究进展[J]. 东惟玲,方琪,单立冬.  中国神经免疫学和神经病学杂志. 2014(03)
[3]维甲酸联合神经生长因子体外诱导人脐血间充质干细胞向神经样细胞定向分化的实验研究[J]. 陈乃耀,王大力,张江,李莹.  陕西医学杂志. 2010(04)



本文编号：3472639