短发夹基因干扰细胞周期检测点激酶1/2表达对脑肿瘤干细胞放疗敏感性的影响

发布时间：2021-11-18 04:50

　　目的原代培养出具有干细胞特性的胶质瘤干细胞并进行体内体外的鉴定，为胶质瘤干细胞靶向治疗实验奠定基础。方法术中留取高级别胶质瘤标本（术后病理证实WHOⅢ或以上胶质瘤），组织胰酶消化法提取细胞，用悬浮神经球培养方法培养出胶质瘤干细胞（Glioblastomastem-like cell, GSC）；免疫荧光法、RT-PCR法检测GSCs表面标志物，在裸鼠（Bulb/cnude mice）颅内再次成瘤实验检测GSCs成瘤性。对数据采用SPSS17.0进行统计学分析。结果在悬浮神经球干细胞培养条件下，成功培养出成球生长的胶质瘤干细胞球（GSC-Sph）；RT-PCR、Western Blotting和免疫荧光检测提示原代培养的GSCs高表达CD133（3.02%⁴.92%）; Western Blotting检测提示GSCs在蛋白水平高表达Nestin；将原代培养的GSCs种植于裸鼠脑内，8周后成瘤，成功构建裸鼠原位移植瘤模型。结论通过留取人高级别胶质瘤原代悬浮神经球干细胞培养方法可以得到具有干细胞特性的GSCs。其高表达干细胞表面标志物CD133和Nestin。GSCs... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

原代GSCs在干细胞条件和分化条件下镜下观A：干细胞悬浮培养条件培养基(DMEM-F12含20%BIT，EGF20ng/ml,bFGF20ng/ml,

附 图图 1 原代 GSCs 在干细胞条件和分化条件下镜下观A：干细胞悬浮培养条件培养基 (DMEM-F12 含 20%BIT，EGF 20 ng/ml, bFGF 20 ng/LIF 10 ng/ml, 1 × B27)下呈球悬浮生长；B：GSCs放到含血清培养基中培养，24 h后细胞贴壁生长，并有小的突起从细胞边缘伸出。

GSCs呈球悬浮生长，CD133染色阳性，种植于裸鼠脑内平均8周成瘤，HE染色证实颅内成瘤

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3502243