PR-957对小鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及机制研究

发布时间：2021-11-18 16:26

　　研究目的:急性缺血性脑卒中可通过激活炎症反应导致继发性脑损伤,进而使临床症状进一步加重。有研究表明T淋巴细胞可能在缺血性卒中的进展中起重要作用。因此,干预炎症反应对于缺血再灌注损伤是一种很有潜力的治疗方法。大脑中动脉闭塞（MCAO）模型是目前研究脑缺血再灌注损伤的经典动物模型,在缺血性脑卒中机制探索和药物筛选中得到了广泛的应用。免疫蛋白酶体是蛋白酶体家族中一类特殊的蛋白酶体,可以参与调节中枢神经系统的病理生理过程和炎症反应,虽然已有研究表明它参与缺血性脑卒中的病理过程,但它在缺血性脑卒中中的调节作用及作用机制仍然不十分清楚。PR-957是免疫蛋白酶体LMP7亚基选择性抑制剂,它具有高度的选择性和较低的有效药物浓度等优点,已经在多种免疫相关疾病的动物模型中应用,能够改善其症状。在本研究中,我们通过改良线栓法建立小鼠大脑中动脉梗塞模型,通过评定小鼠的神经功能损害程度、梗死体积、炎性细胞浸润、淋巴细胞分化、炎性因子表达及其可能相关的信号通路等方法,来研究PR-957对脑缺血再灌注损伤的作用和可能的机制,为其治疗急性脑梗死提供理论基础和实验依据。研究方法:本研究分析了PR-957在由大脑中动脉... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：118 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１不周药物剂量ＭＣＡＯ的ｍＮＳＳ和脑梗死体积变化??

?天津、医科太学博士学位论文及信号通路上的关键囡子（ＲＯＲｙｔ）。??（１）?ＲＴ－ＰＣＲ?原理??ＲＴ－ＰＣＲ即反转录ＰＣＲ，是将ＲＮＡ的反转录（ＲＴ）和ｃＤＮＡ的聚合酶链扩增反应（ＰＣＲ）相结含的技术。首先以从组织或细胞中提取的ＲＮＡ为模在反转录酶■?ＲｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ？ＲＴ?ｒｅａｇｅｎｔ作用下，合成ｃＤＮＡ；再以ｃＤＮＡ为板进行Ｒｅａｌ?Ｔｉｍｅ扩增反应。（见图３）??

（３）蛋白电泳??（一）安装制胶架，并检测其密封性??选择两个ｌ〇ｍｍ的玻璃板，充分洗净，最｜ｆ用双蒸水（ｄｄＨ２〇）冲洗．，晾干。??将两玻璃板对齐后垂直卡入制胶架（较厚玻璃板位于后侧），将两板阖定在架子??上，夹紧，为防止漏胶，下方垫好海绵垫，检测其密封性。??（二）配制ＳＤＳ分离胶??１）用双蒸水配制１０％过硫酸铵（ＡＰＳ）溶液取ｌｍＬ，避光置于冰盒中，剩佘的??１０％?ＡＰＳ置于－２０°Ｃ冰箱备用（避免反复冻融）。??２）配制ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分离胶：制备浓度为１２％的分离胶，按照配置表（见图４）??分别按比例加入双蒸水（ｄｄＨ２〇）、３０％的丙烯酰胺、１．５ｍｍｏｌ／ｌ的Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、１０％??的ＳＤＳ、１０％的ＡＰＳ，加样过程中用移液枪不断吹打，使各组分能混合均匀，??最后加入ＡＰＳ和ＴＥＭＥＤ。??


本文编号：3503222