丝/苏氨酸激酶1在胶质瘤发生、发展中的作用及其机制研究

发布时间：2021-11-26 01:25

　　胶质瘤是最常见的颅内肿瘤,发病率和复发率都很高、病人预后较差。目前,临床上主要治疗为手术切除病灶联合术后放化疗,但是,患者仍然难以达到长期存活。因此,为了研究胶质瘤的发生,发展的分子机制,寻找脑胶质瘤治疗的新靶点,已成为近年来胶质瘤诊治中的热点之一。人类PIM1基因编码一种丝/苏氨酸激酶（serine/threoninekinase）:PIM1,它在人体的各种组织和细胞中广泛表达,并在肿瘤发展中起重要作用。PIM是编码丝状/苏氨酸激酶之一的原癌基因,由PIM1,PIM2和PIM3家族成员组成的PIM家族是钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶家族,其在不同组织中表达不同:PIM1在造血细胞中高度表达;PIM1激酶的潜在致肿瘤性在血液和实体肿瘤中高度表达。靶向抑制蛋白激酶可显著提高胶质瘤患者的生存时间。研究表明,VEGF/AKT/eNOS信号通路参与神经胶质瘤细胞的生存、增殖、侵袭、凋亡及血管形成等进程中,迄今为止,PIM1激酶在神经胶质瘤及正常脑组织中的表达差异尚不清楚;PIM1激酶在神经胶质瘤细胞中的增殖、侵袭及血管形成过程中的作用及其分子机制尚不清楚;PIM1介导的胶质瘤细胞增殖、侵袭和血管形... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１正常脑组织及各级别胶质瘤组织中Ｐ１Ｍ１免疫组化染色（ｘ４０（））??

图２－１?ｐＧＭＬＶ－ＳＣ５?ＲＮＡｉ慢病毒载体??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?ｐＧＭＬＶ－ＳＣ５?ＲＮＡｉ?Ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ?ｖｅｃｔｏｒ??Ｂ通过限制酶ＢａｍＨＩ?（ＧＧＡＴＣＣ）和ＥｃｏＲＩ?（ＧＡＡＴＴＣ）使载体线性化，并连??

Ｆｉｇｕｒｅ?２－２?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃ?ｒｅｓｕｌｔｓ??３）?ｓｈＲＮＡ与引物连接??连接体系如下：????回收载体?３＾１?（５０?ｎｇ）??Ｏｌｉｇｏ?引物?ｌ＾ｉｌ?（０．５｜ｉＭ）??Ｔ４?ＤＮＡ?ｌｉｇａｓｅ?ｂｕｆｆｅｒ?１?－５［ｉｌ????Ｔ４?ＤＮＡ?连接酶?Ｕｉｌ???ｄｄＨ：Ｑ?补足?１５ｐｌ??于２５?°Ｃ水浴中孵育３０?ｍｉｎ。??４）转化??细胞置于冰上自然融化，连接产物全部加入细胞，冰上２８ｍｉｎ，４２°Ｃ水浴??９０ｓ热休克。然后迅速放置在冰上３－６分钟。在３７°Ｃ下以１９０ｒｐｍ振荡添加ｌｍｌ??不含抗生素的ＬＢ培养基４７分钟。以２９００ｒｐｍ离心３分钟，弃去约７２０?ｕ?１上??皿，器，??

【参考文献】：
期刊论文
[1]热休克蛋白70及pim-1基因在白血病骨髓单个核细胞的表达特点及临床意义[J]. 李颖,旷文勇,李睿娟,张广森,彭宏凌.  中国实验血液学杂志. 2008(02)



本文编号：3519151