miR-103/195/15b调控SALL4抑制脑胶质瘤细胞增殖及侵袭作用的研究

发布时间：2021-12-02 13:10

　　近年来的研究表明,miRNA通常在转录后水平来调控基因的表达,其在肿瘤组织中的异常表达与肿瘤的发生发展有至关重要的作用。在胶质瘤的研究中,miRNA与SALL4的调控关系的研究较少,具有相同“种子区”的多个目标miRNA共同调控SALL4也未见报道。为了探究miR-103、miR-195和mi R-15b的作用,我们采用MTT增殖实验发现miR-103、miR-195和miR-15b可以显著抑制脑胶质瘤细胞的增殖能力。为了探讨其抑制增殖的机制,我们采用PI/AnnexinV双染色流式细胞仪分析细胞凋亡,发现miR-103、miR-195和miR-15b可以诱导脑胶质瘤细胞的凋亡,且这3种miRNA存在竞争关系。同时,我们也采用Transwell细胞小室实验检测这3种miRNA对胶质瘤细胞迁移及侵袭能力的影响。结果显示,miR-103、miR-195和miR-15b可以在不同程度上抑制细胞的迁移和侵袭,并且共同转染这3种miRNA的结果表明miR-103、miR-195和miR-15b存在竞争关系。我们用实时定量RT-PCR技术对mi R-103、miR-195和miR-15b在脑胶质瘤... 

【文章来源】：哈尔滨工业大学黑龙江省 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 课题背景及研究的目的和意义
    1.2 SALL4基因国内外研究现状及分析
        1.2.1 原癌基因SALL4简介
        1.2.2 SALL4基因与肿瘤发生的关系
    1.3 miRNA研究现状
        1.3.1 miRNA的作用机制
        1.3.2 miRNA与肿瘤
        1.3.3 miR-103/195/15b在肿瘤中的研究进展
    1.4 主要研究内容
    1.5 技术路线
第2章 材料方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞系
        2.1.2 实验材料与试剂
        2.1.3 试剂配方
        2.1.4 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养及转染
        2.2.2 双荧光素酶报告系统检测
        2.2.3 RT-PCR
        2.2.4 Western Blot
        2.2.5 MTT增殖实验
        2.2.6 细胞贴附依赖性生长实验
        2.2.7 PI/Annexin V检测细胞凋亡实验
        2.2.8 Transwell细胞侵袭及迁移实验
        2.2.9 细胞划痕实验
        2.2.10 慢病毒包装及感染
    2.3 分析软件
第3章 miR-103/195/15b竞争性抑制增殖与迁移
    3.1 miR-103/195/15b抑制细胞增殖
        3.1.1 miR-103/195/15b在胶质瘤细胞系的表达
        3.1.2 miR-103/195/15b过表达检测
        3.1.3 miR-103/195/15b对增殖的影响
        3.1.4 miR-103/195/15b对凋亡的影响
    3.2 miR-103/195/15b抑制细胞迁移及侵袭
        3.2.1 miR-103/195/15b对细胞迁移的影响
        3.2.2 miR-103/195/15b对细胞侵袭的影响
    3.3 讨论
    3.4 本章小结
第4章 miR-103/195/15b靶向调控SALL4的表达
    4.1 SALL4为miR-103/195/15b靶基因的确认
        4.1.1 SALL4与miR-103/195/15b表达相关性分析
        4.1.2 靶基因的预测与鉴定
    4.2 SALL4促进胶质瘤细胞的迁移与侵袭
        4.2.1 慢病毒包装并筛选SALL4高表达细胞系
        4.2.2 SALL4对脑胶质瘤侵袭及迁移的影响
    4.3 讨论
    4.4 本章小结
结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]SALL4在疾病中的研究进展[J]. 卜建设,李宝艳,秦成路,廖莳.  中外医学研究. 2011(24)

博士论文
[1]中药黄芩苷通过下调miR-294抑制小鼠D3胚胎干细胞增殖能力[D]. 王键.华中科技大学 2013



本文编号：3528506