来氟米特诱导自噬的分子机制及其对ALS相关SOD1突变体的自噬性降解作用研究

发布时间：2021-12-10 16:16

　　脊髓侧索硬化症（Amyotrophic lateral sclerosis,ALS）是一种致死性的神经退行性疾病,目前尚无治愈手段。在确诊病例中,90%为散发性ALS,剩下10%为家族遗传性。目前已知多种致病基因,其中20%的家族性ALS患者携带突变的铜/锌超氧化物歧化酶（Cu/Zn Superoxide dismutase 1,SOD1）基因,这些患者的运动神经元内往往有大量突变的SOD1G93A聚集物积累,进而导致运动神经元死亡。自噬是细胞对自身多余蛋白质和受损细胞器进行吞噬、降解和循环再利用的过程。在自噬发生过程中,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin,mTOR）和腺苷酸活化蛋白激酶（Adenosine 5’-monophosphate（AMP）-activated protein kinase,AMPK）扮演着非常重要的作用。mTOR是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,它能够磷酸化ULK1的S757位点,从而抑制自噬体的组装。而另一方面,AMPK能够磷酸化激活ULK1的S555位点,从而诱导自噬的发生。来氟米特是一种免疫抑制剂,广泛应用于治疗... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２．?Ａ７７?１７２６诱导自嗤的能力

图１抑制Ｓ６Ｋ１诱导自噻

３．?２?Ａ７７?１７２６?抑制?Ｓ６Ｋ１?激活?ＡＭＰＫ?和?ＵＬＫ１??ＡＭＰＫ可磷酸化ＵＬＫ１Ｓ５５５并引起自噬。在这里，我们分别用５０，１００，?２００ｐＭ?Ａ７７?１７２６??处理ＮＳＣ３４细胞，Ｒａｐａ作为阳性对照。如图６－Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ａ７７?１７２６对ＡＭＰＫＴ１７２，??ＵＬＫ１Ｓ５５５，?ＡＣＣＳ７９磷酸化表达有着明显的时间剂量依赖效应，随着Ａ７７?１７２６浓度或作用??时间的增加，ＡＭＰＫＴ１７２，ＵＬＫ１Ｓ５５５，ＵＬＫ１Ｓ７５７和ＡＣＣＳ７９表达也随之增加，而Ｒａｐａ虽然??对ＵＬＫ１Ｓ５５５和ＡＭＰＫＴ１７２的表达没有明显影响，但是抑制了?ＵＬＫ１Ｓ７５７的磷酸化。为了验??证ＵＬＫ１和ＡＭＰＫ磷酸化激活是否是因为Ａ７７?１７２６抑制了?Ｓ６Ｋ１的活性，分别用Ｓ６Ｋ１??ｓｉＲＮＡ及ＰＦ－４７０８６７１抑制Ｓ６Ｋ１表达，并对处理组细胞内相关蛋白进行Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ分析。??如图?６－Ｅ，Ｆ，?Ｇ，Ｈ，与?Ａ７７?１７２６?处理结果相似，ＡＭＰＫＴＩ７２，?ＵＬＫ１Ｓ５５５，?ＵＬ１Ｓ７５７，?ＡＣＣＳ７９??磷酸化表达均上调。??

【参考文献】：
期刊论文
[1]自噬流的检测方法[J]. 吕晓希,胡卓伟.  药学学报. 2016(01)



本文编号：3532966