谷氨酸/NMDA1、Shh介导的成体NSC增殖分化信号通路的研究

发布时间：2021-12-17 03:26

　　背景近年来,损伤脑组织的修复一直是国内外研究的重点与难点。研究发现谷氨酸可以促进神经干细胞（NSC:Neural Stem Cells）的增殖与分化,为损伤脑组织的修复提供了新的理论基础和思路。脑梗死及脑组织缺血损伤后会导致细胞凋亡,从而使大量谷氨酸（glutamic acid）外流,引起局部谷氨酸升高。虽然浓度升高的谷氨酸对组织有毒害作用,但是一定浓度的谷氨酸却可以促进NSC的增殖与分化。随着研究的不断深入,我们发现谷氨酸是通过其受体及Shh（sonic hedgehog）信号通路来促进NSC的增殖和分化。和以往的细胞学角度的研究相比,近年来不断进步与完善的分子生物学技术为我们提供新的研究方法和思路。在本文中,我们从分子层面深入地对谷氨酸及其受体及Shh （sonic hedgehog）信号通路介导的NSC的增殖和分化进行了研究。目的体外培养3日龄SD大鼠海马区原代神经干细胞,并使用传代三代以上神经干细胞来筛选目的基因最适浓度,向三代神经干细胞中加入目的基因,上调和沉默Shh基因后观察神经干细胞中谷氨酸刺激下Nesting的表达,Shh信号通路对神经干细胞增殖能力的影响,同时阻断上游... 

【文章来源】：新乡医学院河南省

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１神经干细胞生长情况ｌＯＯＸ??

我们将不同分组的病毒质粒依次进行ＲＮＡ提取，为了验证病毒质粒??的准确性，将各组进行琼脂糖电泳鉴定，鉴定结果表明各组病毒质粒均??能正常表达。（图２）??２３??

＞０．０５）；?Ｓｈｈ－ｓｈＲＮＡ组Ｓｈｈ蛋白表达明显受爵Ｊ抑制（尸＜０．０５），而Ｎｅｓｔｉｎ蛋白表达未??受到明显影响（户＞０．０５）?；?ＮＣ－ｓｈＲＮＡ组中Ｓｈｈ、Ｎｅｓｔｉｎ蛋白检测结果显示，Ｓｈｈ??及Ｎｅｓｔｉｎ蛋白表达均明显增加（戶＜０．０５）。（图７）??ＧＡＰＤＨ?ｉＭＭ?ａｍｉ?ｎｉｌ?ｉｎｉ?４＾＾’?誦??ｒｎｍｍ?线公拳潮ｐｉｔｏ?１７邸??－?＇??Ｎｅｓｔｉｎ?善凌顺誦??务?游?沪??＊難?＃?沪??－?＃?如ｗ－－——??渗?垃??文５?ｆ??Ｕｎ?’?１＇??银?效＊?巧加ｃ傑店?欽卸據献?窃材艦ｊｔｉ莱睐??爲＾？州。??图７谷氨酸刺激下Ｓ化及Ｎｅｓｔｉｎ表达量均升高，当ＮＭＤＡ民１抑制存在化Ｓ化及Ｎｅ巧ｉｎ表达??量均无明显变化，当Ｓｈｈ被ＲＮＡｉ沉默后Ｓｈｈ?ｍＲＮＡ表达量明显下降；??２９??


本文编号：3539324