GCDH沉默和赖氨酸过量对纹状体神经元的神经毒性作用及机制研究

发布时间：2021-12-18 00:23

　　第一部分赖氨酸致原代大鼠纹状体神经元神经毒性的体外研究目的分离培养高纯度的原代大鼠纹状体神经元,探讨赖氨酸对体外培养纹状体神经元的神经毒性作用。方法分离出生24h内SD乳鼠的纹状体,应用胰酶消化、无血清培养基培养法培养纹状体神经元。利用微管相关蛋白（microtubule-associated protein MAP2）染色免疫荧光及流式细胞方法鉴定神经元纯度。不同浓度的赖氨酸（0、5、10、15、20mmol/L）干预神经元24h后,MTT法测定细胞活性,探讨不同浓度赖氨酸对原代纹状体神经元的神经毒性作用。结果MAP2免疫荧光法显示培养细胞神经元纯度为92.4±1.6%,MAP2染色流式细胞计数显示神经元纯度为94.3±2.5%。MTT结果显示小于10mmol/L赖氨酸干预24h对神经元存活无影响。15mmol/L赖氨酸干预24h神经元存活率为84.63%,20mmol/L赖氨酸干预24h神经元存活率降为45.60%。结论胰酶消化无血清培养基培养法可成功培养高纯度的大鼠纹状体神经元。赖氨酸干预24h,浓度不超过10mmol/L时对神经元无毒性,浓度达到15mmol/L以上时,赖氨酸神... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：98 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
英文缩略表
前言
    参考文献
中文摘要
Abstract
第一部分 赖氨酸致原代大鼠纹状体神经元神经毒性的体外研究
    前言
    实验材料和方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
第二部分 慢病毒介导的GCDH基因沉默和赖氨酸过量摄取对纹状体神经元的神经毒性作用
    前言
    实验材料和方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
第三部分 赖氨酸对GCDH基因沉默纹状体神经元神经毒性作用的可能机制探讨
    前言
    实验材料和方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
综述
    参考文献
附录 博士期间发表论文情况
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]串联质谱技术选择性筛查遗传代谢病高危患儿552例初步分析[J]. 娄燕,尹娜,陈凤琴,程亚颖,徐丽瑾,戴方,宋晓涛.  中国当代儿科杂志. 2011(04)
[2]戊二酸尿症Ⅰ型患者的临床、影像与病理特点[J]. 姚生,刘建国,于健,王巍,戚晓昆.  中国神经免疫学和神经病学杂志. 2008(01)
[3]戊二酸血症I型患者的临床与脑磁共振成像特点[J]. 齐朝月,宋金青,肖江喜,谢晟,杨艳玲,张尧,孙芳,秦炯,吴希如.  中国医刊. 2006(07)



本文编号：3541250