羟基红花黄色素A对OGD后BV2细胞炎症反应作用的研究及其机制探讨
发布时间：2022-01-03 08:33
缺血性卒中是全球致死率和致残率最高的三大疾病之一。炎症反应贯穿于缺血性卒中的整个病理过程，是影响卒中预后的主要因素之一。小胶质细胞是中枢神经系统中固有免疫细胞，缺血性卒中发生后，小胶质细胞随即被激活。过度活化小胶质细胞具有神经毒性，在缺血性卒中后炎症反应中发挥重要作用。调控小胶质细胞激活后产生的炎症反应是目前具有前景的卒中治疗新靶标。羟基红花黄色素A（hydroxysafflor yellow A, HSYA）是红花黄色素的主要成分，前期研究发现它可以通过抑制炎症反应进而减少缺血性卒中实验模型的脑损伤，然而，HSYA对卒中后小胶质细胞的直接作用尚不明确。目的：本研究意旨在氧糖剥夺（oxygen-glucose deprivation, OGD）模型中证实HSYA是否具有细胞保护与炎症抑制作用，并探讨其可能机制，为缺血性卒中的治疗策略提供新思路。方法：制备OGD模型；MTT法、LDH法及流式细胞术评估细胞活力或细胞凋亡率；RT-PCR检测炎症因子（IL-1β、TNF-α、iNOS、COX-2和MCP-1）mRNA表达水平；western blot检测NF-κB和MAPK通路的活性。结果：...
【文章来源】：南京医科大学江苏省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
实验设计图
HSYA 减轻 OGD 所致的 BV2 细胞损伤.1 HSYA 对 BV2 细胞安全性检测为明确 HSYA 对细胞活力的影响，同时检测药物的安全性，我们利用 BV2 细胞处理前后的细胞活力进行评估。测得 CON 组细胞活0±4.8%。之后，分别以 HSYA20μM、40μM、80μM、160μM、320μM、6280μM处理BV2细胞，12h后，测得细胞活力分别为104.4±4.5%、100.0±±4.9%、100.1±3.8%、99.6±10.8%、105.4±6.0%、91.0±4.8%。所有数据ON 组比较后的标准化百分数。如图 2 所示，各组数据统计后无显著0.05。本组数据表明，经不同浓度 HSYA 处理后，BV2 细胞在实验所均具有安全性，可根据后续实验需要，选择适当浓度。
测得其细胞活力为 37.0±1.6%，即 OGD 处理后 BV2 细胞 组相比下降（*p < 0.05）。SYA 能够提高 OGD 后 BV2 细胞的细胞活性。我们利用 MTT 法 作用于 BV2 细胞是否具有剂量依赖性，进一步选择最佳反应浓度OGD处理后立即加入不同剂量的HSYA（即20μM、40μM、80μM、1M、640μM 和 1280μM），孵育 12h 后，利用 MTT 试验检测 BV2 细，具体如下，40μM：49.7±1.3%，80μM：54.1±3.9%，160μM：62.0±3M：57.5±4.4%，640μM：59.6±2.7%，1280μM：49.0±3.8%，相较 O加（#p < 0.05，图 3）；需要注意的是，HSYA 用量为 20μM 时， 43.3±2.6%，与 OGD 组相比较未表现明显差异(#p>0.05)。本组研HSYA 的细胞保护作用具有严格的剂量依赖性。研究发现，加入 后细胞活力处于高峰值，我们选择该剂量应用于后续研究中。
【参考文献】：
期刊论文
[1]羟基红花黄色素A对脑缺血-再灌注大鼠脑组织细胞间黏附分子1表达的影响[J]. 李芳君. 中药材. 2012(07)
[2]红花及其主要成分的药理作用研究进展[J]. 陈梦,赵丕文,孙艳玲,孙丽萍. 环球中医药. 2012(07)
[3]脂多糖对BV-2细胞的形态及肿瘤坏死因子-α表达的影响[J]. 黄红伟,沈伟. 临床神经病学杂志. 2011(05)
[4]红花黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 张庆,郑冬雁,徐红岩,潘燕,魏蜀一. 山东大学学报(医学版). 2011(06)
[5]脂多糖诱导肝细胞HMGB1释放及其信号通路研究[J]. 陈国千,邵耀明,王春新,吴国荣,徐明. 中国实验诊断学. 2009(11)
[6]天麻素对高糖诱导的神经小胶质细胞IL-1β,IL-6表达的影响[J]. 杜晓红,毛瑞阳,刘毅,李颖,单亦升. 中国中药杂志. 2009(12)
[7]羟基红花黄色素A对脑缺血大鼠皮层炎症信号转导途径相关因子的抑制作用[J]. 陈亭亭,杜玉娟,刘晓雷,朱海波. 药学学报. 2008(06)
[8]丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）信号转导通路与卵巢上皮癌[J]. 吴冬,欧俊,惠宁. 肿瘤. 2007(08)
[9]羟基红花黄色素A对局灶性脑缺血后大鼠脑组织诱导型一氧化氮合酶的影响[J]. 盛雨辰,夏玉叶,闵旸. 中国药理学通报. 2006(09)
[10]羟基红花黄色素A对大鼠局灶性脑缺血再灌注NMDAR1蛋白表达的影响[J]. 梁辉,范金英,李爱华,周盛年,李强,朱海波. 中华老年心脑血管病杂志. 2004(03)
本文编号：3565948
【文章来源】：南京医科大学江苏省
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
实验设计图
HSYA 减轻 OGD 所致的 BV2 细胞损伤.1 HSYA 对 BV2 细胞安全性检测为明确 HSYA 对细胞活力的影响，同时检测药物的安全性，我们利用 BV2 细胞处理前后的细胞活力进行评估。测得 CON 组细胞活0±4.8%。之后，分别以 HSYA20μM、40μM、80μM、160μM、320μM、6280μM处理BV2细胞，12h后，测得细胞活力分别为104.4±4.5%、100.0±±4.9%、100.1±3.8%、99.6±10.8%、105.4±6.0%、91.0±4.8%。所有数据ON 组比较后的标准化百分数。如图 2 所示，各组数据统计后无显著0.05。本组数据表明，经不同浓度 HSYA 处理后，BV2 细胞在实验所均具有安全性，可根据后续实验需要，选择适当浓度。
测得其细胞活力为 37.0±1.6%，即 OGD 处理后 BV2 细胞 组相比下降（*p < 0.05）。SYA 能够提高 OGD 后 BV2 细胞的细胞活性。我们利用 MTT 法 作用于 BV2 细胞是否具有剂量依赖性，进一步选择最佳反应浓度OGD处理后立即加入不同剂量的HSYA（即20μM、40μM、80μM、1M、640μM 和 1280μM），孵育 12h 后，利用 MTT 试验检测 BV2 细，具体如下，40μM：49.7±1.3%，80μM：54.1±3.9%，160μM：62.0±3M：57.5±4.4%，640μM：59.6±2.7%，1280μM：49.0±3.8%，相较 O加（#p < 0.05，图 3）；需要注意的是，HSYA 用量为 20μM 时， 43.3±2.6%，与 OGD 组相比较未表现明显差异(#p>0.05)。本组研HSYA 的细胞保护作用具有严格的剂量依赖性。研究发现，加入 后细胞活力处于高峰值，我们选择该剂量应用于后续研究中。
【参考文献】：
期刊论文
[1]羟基红花黄色素A对脑缺血-再灌注大鼠脑组织细胞间黏附分子1表达的影响[J]. 李芳君. 中药材. 2012(07)
[2]红花及其主要成分的药理作用研究进展[J]. 陈梦,赵丕文,孙艳玲,孙丽萍. 环球中医药. 2012(07)
[3]脂多糖对BV-2细胞的形态及肿瘤坏死因子-α表达的影响[J]. 黄红伟,沈伟. 临床神经病学杂志. 2011(05)
[4]红花黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 张庆,郑冬雁,徐红岩,潘燕,魏蜀一. 山东大学学报(医学版). 2011(06)
[5]脂多糖诱导肝细胞HMGB1释放及其信号通路研究[J]. 陈国千,邵耀明,王春新,吴国荣,徐明. 中国实验诊断学. 2009(11)
[6]天麻素对高糖诱导的神经小胶质细胞IL-1β,IL-6表达的影响[J]. 杜晓红,毛瑞阳,刘毅,李颖,单亦升. 中国中药杂志. 2009(12)
[7]羟基红花黄色素A对脑缺血大鼠皮层炎症信号转导途径相关因子的抑制作用[J]. 陈亭亭,杜玉娟,刘晓雷,朱海波. 药学学报. 2008(06)
[8]丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）信号转导通路与卵巢上皮癌[J]. 吴冬,欧俊,惠宁. 肿瘤. 2007(08)
[9]羟基红花黄色素A对局灶性脑缺血后大鼠脑组织诱导型一氧化氮合酶的影响[J]. 盛雨辰,夏玉叶,闵旸. 中国药理学通报. 2006(09)
[10]羟基红花黄色素A对大鼠局灶性脑缺血再灌注NMDAR1蛋白表达的影响[J]. 梁辉,范金英,李爱华,周盛年,李强,朱海波. 中华老年心脑血管病杂志. 2004(03)
本文编号：3565948
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