内质网应激和未折叠蛋白反应相关分子对儿童自身免疫性脑炎T淋巴细胞的影响

发布时间：2022-01-06 13:32

　　目的观察内质网应激（Endoplasmic ReticulumStress,ERS）对自身免疫性脑炎（Autoimmune Encephalitis,AE）病人T淋巴细胞存活和凋亡的影响以及未折叠蛋白反应（Unfolded Protein Response,UPR）信号通路在AE淋巴细胞存活和死亡中的作用。方法本研究在2017年2月至2019年2月选取石家庄市第一医院儿科AE病人和健康供者外周血样本进行研究,并用不同浓度的毒胡萝卜素（Thapsigargin,TG）（浓度为0、0.5、1、5、10 nM）分别处理AE病人和健康供者的T淋巴细胞48 h,然后利用八肽胆囊收缩素（cholecystokinin octapeptide,CCK-8）实验方法检测细胞存活能力;用TG（浓度为5 nM）分别处理AE病人和健康供者的T淋巴细胞48 h,流式细胞仪检测TG未处理以及TG处理的T淋巴细胞的细胞凋亡情况;TG（浓度为5 n M）刺激AE病人和健康供者的T淋巴细胞48 h,蛋白质印迹法（Western blot）检测UPR标志分子免疫球蛋白结合蛋白（BIP）和同源蛋白（CHOP）的蛋白表达水... 

【文章来源】：安徽医药. 2020,24(10)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

TG诱导可促进自身免疫性脑炎（AE）病人的T淋巴细胞凋亡

将AE病人外周血淋巴细胞（PBMCs）和健康供体中分离的T淋巴细胞，分别用TG(5 n M）处理这两种细胞，48h后收集细胞并提取蛋白。蛋白质印迹法检测UPR标志分子BIP(UPR的中心调节因子）和CHOP（抑制Bcl-2基因启动子）的蛋白表达水平，实验结果（图2）显示：与健康供体UPR标志分子BIP和CHOP的蛋白表达水平（0.50±0.05、0.53±0.06）%相比，AE病人外周血T淋巴细胞BIP(0.23±0.04）%的表达降低，而CHOP(0.81±0.07）%的表达显著升高，差异有统计学意义（t=10.329、7.439,P<0.01）。以上结果提示，BIP和CHOP可能介导内质网应激诱导的外周血T淋巴细胞凋亡。2.4 TG诱导后T淋巴细胞凋亡相关蛋白的表达

内质网应激诱导的细胞凋亡受抗凋亡和促凋亡信号调控，包括Bcl-2、Bcl-XL、Bax。分别用TG(5n M）处理从AE病人外周血淋巴细胞（PBMCs）和健康供体中分离T淋巴细胞，48 h后收集细胞并提取蛋白。蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-XL和Bax的表达水平，实验结果（图3）显示：与健康供体凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-XL和Bax的表达水平[（1.41±0.04）%、（1.23±0.06）%、（0.51±0.01）%]相比，AE病人的T细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2(0.73±0.07）%和Bcl-XL(0.51±0.05）%表达水平降低，而促凋亡蛋白Bax(1.25±0.05）%表达增加，差异有统计学意义（t=35.548、20.660、22.581,P<0.01）。以上结果表明BIP和CHOP可能通过抗凋亡信号和促凋亡信号介导内质网应激诱导的外周血T淋巴细胞凋亡。3 讨论


本文编号：3572545