6-姜酚对T细胞增殖分化与小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎影响研究

发布时间：2022-01-07 04:24

　　目的:1.应用6-姜酚能上调活性氧簇的特点,研究6-姜酚对T细胞增殖与分化的影响。2.进一步将6-姜酚应用于T细胞介导的多发性硬化症理想模型——实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型的防治影响实验,验证其疗效。方法:1.处死C57BL/6小鼠后分离其脾脏与淋巴结,用毛玻璃片研磨制成组织匀浆。使用离心机分离去除结缔组织后,再使用红细胞裂解液裂解并再次分离去除红细胞,得到脾细胞悬液。使用T细胞分选试剂盒分选后可得到T细胞悬液在细胞培养板进行培养与实验,而使用CD4+T细胞分选后可得CD4+T细胞。T细胞悬液用于初步测试6-姜酚对于T细胞的增殖影响,使用流式细胞术检测细胞增殖的峰值状态。CD4+T细胞添加不同细胞因子处理并优化出最佳添加方案,于48孔细胞培养板培养可分别获得调节性T细胞等。将6-姜酚应用于上述细胞因子处理培养过程,使用流式细胞术检测细胞增殖峰值与细胞分化数量,了解并分析其对T细胞的增殖与分化过程的影响。2.髓鞘少突胶质细胞糖蛋白MOG35-55多肽、百日咳毒素与结核分枝杆菌联合使用构建小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型,将C57BL/6小鼠麻醉后进行注射。百日咳毒素于构建时与构建48... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：95 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同浓度CFSE染色效果（A为0.2uM,B为0.5uM），X轴为CFSE荧光强度，Y轴为细胞数量Figure2.1CFSEstainingeffectofdifferentdoses(A:0.2uM,B:0.5uM)

9图2.2不同浓度CFSE染色效果（A为0.1uM,B为1.0uM），X轴为CFSE荧光强度，Y轴为细胞数量Figure2.2CFSEstainingeffectofdifferentdoses(A:0.1uM,B:1.0uM)经过重复数次实验后最终选定0.5μM浓度CFSE染色时效果最佳，因此摒弃0.2μMCFSE染色浓度，将0.5μM染色浓度确立为最佳染色浓度应用于后继实验检测细胞增殖状态时使用。2.3.2T细胞与CD4+T细胞CFSE增殖染色结果将脾细胞CFSE染色实验优化出的染色浓度0.5μM应用于T细胞增殖染色实验后,得到增殖结果如下。左侧为增值情况的流式散点图结果，右侧则为流式柱状图结果。图2.30.5uMCFSE对脾细胞染色效果，X轴为CFSE荧光强度Y轴为细胞数量Figure2.3CFSEstainingeffectof0.5uMonspleencellsAB

9图2.2不同浓度CFSE染色效果（A为0.1uM,B为1.0uM），X轴为CFSE荧光强度，Y轴为细胞数量Figure2.2CFSEstainingeffectofdifferentdoses(A:0.1uM,B:1.0uM)经过重复数次实验后最终选定0.5μM浓度CFSE染色时效果最佳，因此摒弃0.2μMCFSE染色浓度，将0.5μM染色浓度确立为最佳染色浓度应用于后继实验检测细胞增殖状态时使用。2.3.2T细胞与CD4+T细胞CFSE增殖染色结果将脾细胞CFSE染色实验优化出的染色浓度0.5μM应用于T细胞增殖染色实验后,得到增殖结果如下。左侧为增值情况的流式散点图结果，右侧则为流式柱状图结果。图2.30.5uMCFSE对脾细胞染色效果，X轴为CFSE荧光强度Y轴为细胞数量Figure2.3CFSEstainingeffectof0.5uMonspleencellsAB


本文编号：3573809