泛素化对动脉粥样硬化中NLRP3炎性小体的自噬性调节机制作用研究

发布时间：2022-01-09 19:08

　　目的:动脉粥样硬化（AS）是缺血性卒中的重要病因。炎症,尤其是NLRP3炎性小体参与了动脉粥样硬化斑块形成的核心过程,增强自噬可以抑制动脉粥样硬化的发生发展,二者之间的相互作用近年来受到广泛关注。近期有研究显示NLRP3炎性小体可以被自噬降解,这一过程伴有炎性小体组成蛋白的泛素化修饰。但是动脉粥样硬化中两者的关系及泛素化在两者衔接中的作用及相关机制尚不明确。本研究主要有以下目标:1、验证ox-LDLs对泡沫细胞中炎症和自噬的影响;2、验证泡沫细胞中自噬和炎症的关系;3、探索自噬是通过影响哪些炎症相关蛋白调节NLRP3炎性小体功能;4、确定在自噬精确识这些炎症相关蛋白过程中起作用的泛素链。方法:1、用ox-LDLs干预THP-1来源的巨噬细胞建立泡沫细胞模型。在泡沫细胞模型中,给与时间梯度和浓度梯度的ox-LDLs刺激,应用Western blot和ELISA方法,检测NLRP3炎性小体及自噬相关蛋白表达水平,观察ox-LDLs对NLRP3炎症和自噬的影响;2、应用雷帕霉素和3-MA上调或下调泡沫细胞中自噬水平,观察炎症水平及NLRP3炎性小体相关蛋白表达变化;3、对泡沫细胞转染p62-... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ox-LDLs和炎症的关系

ox-LDLs和自噬的关系

青岛大学硕士学位论文16比，p62-siRNA组细胞裂解液中NLRP3、ASC（图4b）和p20（图4b，4c）及上清中的IL-1β（图4d）的表达水平升高。这提示，抑制p62的表达起到了和3-MA、巴弗洛霉素相似的效果，增强了炎症。图3自噬对炎症的影响。（a，b，c）抑制或增强自噬后，p62、LC3及NLRP3炎性小体相关蛋白表达变化；（d）抑制或增强自噬后，细胞培养液上清中IL-1β浓度变化；（e）巴弗洛霉素干预下，NLRP3和ASC表达变化；*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。

【参考文献】：
期刊论文
[1]炎症小体在血栓性疾病发病中的作用研究进展[J]. 王金霞,刘爱飞,李方林,陈懿建.  中国实验血液学杂志. 2017(04)
[2]动脉粥样硬化发病的炎症机制的研究进展[J]. 刘俊田.  西安交通大学学报(医学版). 2015(02)
[3]缺血缺氧状态下细胞自噬的研究进展[J]. 张丹,王海杰.  国际病理科学与临床杂志. 2009(04)
[4]缺血/再灌注过程中心肌细胞自噬研究进展[J]. 李欣志,刘建勋.  中国药理学通报. 2008(06)



本文编号：3579279