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DRP1调控ENT1参与大鼠癫痫发作的作用及机制研究

发布时间:2022-01-13 23:22
  目的:探讨抑制线粒体分裂蛋白信号通路后,观察氯化锂-匹鲁卡品癫痫大鼠模型行为学改变及DRP1和ENT1表达变化。方法:,选取健康成年雄性SD大鼠,腹腔注射氯化锂-匹鲁卡品建立癫痫动物模型,将大鼠随机分为四个实验组:癫痫组(6h、24h、72h、1W四个时间点,n=5×4)、mdivi-1组(DRP1抑制剂)(n=5)、DMSO溶剂对照组(n=5)与正常对照组(n=5)。造模成功后,选首次发作潜伏期,首次癫痫发作后1小时内癫痫大发作(Racine评分4级及以上视为大发作,即造模成功)次数,两方面的行为学来评估各组大鼠癫痫发作程度;透射电镜观察大鼠海马线粒体改变;应用Western Blot、免疫组织化学、免疫荧光标记技术检测DRP1在各实验组大鼠颞叶皮质与海马区的表达情况;应用Western Blot检测ENT1在各实验组大鼠颞叶皮质与海马区的表达情况。结果:1.行为学结果:正常组大鼠无癫痫发作,癫痫组与溶剂对照组的潜伏期分别为24.4±5.12min、23.6±4.67 min,mdivi-1抑制剂组为38.8±1.30 min;首次癫痫大鼠大发作次数为9.0±0.52、溶剂对照组为9... 

【文章来源】:遵义医科大学贵州省

【文章页数】:48 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

DRP1调控ENT1参与大鼠癫痫发作的作用及机制研究


mdivi-1可使匹罗卡品诱发的首次癫痫发作潜伏期明显延长,降低癫痫发作次数

CA1区,线粒体,癫痫,神经元


遵义医学院硕士学位论文 罗 忠2.2 各组大鼠海马 CA1 区线粒体超微结构改变选正常组、24h 癫痫组与 mdivi-1 组大鼠海马 CA1 区脑组织,透射电镜观察各组大鼠海马 CA1 区神经元线粒体超微结构。实验结果发现:正常组大鼠海马 CA1 区神经元线粒体结构完好无损,未见线粒体肿胀及线粒体嵴的破坏;癫痫组与 mdivi-1 组大鼠神经元线粒体存在不同程度的损伤,癫痫组大鼠海马 CA1 区神经元线粒体明显肿胀,线粒体结构明显破坏,部分内外膜崩解;mdivi-1 组大鼠海马 CA1 区神经元线粒体稍肿胀,可见部分嵴的分裂,基质密度降低,未见膜的崩解(图 2)

柱状图,免疫印迹,海马,柱状图


图 3 正常和不同时间点癫痫大鼠海马中 DRP1 的免疫印迹与 DRP1/β-actin 统计柱状图。Fig3 Normal and epilepsy rats hippocampus the DRP1 receptors of western blot and the ratio ofDRP1 receptor/β-Tubulin statistical results.Note:*P<0.05 vs Con group,##P<0.05 vs EP(24h)group,#P>0.05 vs EP(24h) group各组大鼠颞叶新皮质中 DRP1 表达结果:DRP1 在正常大鼠颞叶新皮质中有基础表达,DRP1 蛋白与β-actin 内参蛋白的免疫印迹强度比值为 0.43±0.04;DRP1 蛋白与正常对照组及不同时间点癫痫组免疫印迹强度比值分别为:0.50±0.02、0.81±0.01、1.18±0.02、0.60±0.02、0.45±0.02,癫痫发作 6h 开始直到发作后 1W 的 4 个时间点Drp1 蛋白的表达水平上升,24h 时间点 DRP1 蛋白表达最高,与正常对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),6h、1W 这两个时间点,DRP1 的表达量与正常对照组比较,无统计学意义(P>0.05);在 mdivi-1 组、DMSO 溶剂对照组大鼠颞叶新皮质中免疫印迹强度比值分别为:0.66±0.01、1.17±0.04,mdivi-1 组 DRP1 蛋白的表达较24h癫痫组显著下调,差异具有统计学意义(P<0.05);溶剂对照组与癫痫组(24h)

【参考文献】:
期刊论文
[1]Multimodal brain monitoring in fulminant hepatic failure[J]. Fernando Mendes Paschoal Jr,Ricardo Carvalho Nogueira,Karla De Almeida Lins Ronconi,Marcelo de Lima Oliveira,Manoel Jacobsen Teixeira,Edson Bor-Seng-Shu.  World Journal of Hepatology. 2016(22)
[2]醒脑开窍针刺法结合高压氧治疗一氧化碳中毒迟发性脑病的临床观察[J]. 茅敏,饶萍,牟欣,郭兰,张灵.  中国针灸. 2015(03)



本文编号:3587333

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