基于细胞凋亡调节因子Bax、bcl-2的a-细辛醚对癫痫神经元保护机制的研究

发布时间：2022-01-17 06:07

　　目的：α-细辛醚是中药石菖蒲（Rhizoma Acori Tatarinowii）的主要活性成分之一,祖国医学认为石菖蒲能化痰开窍益智,镇静止痉,是历代医家治疗癫痫的首选中药,但是作用机制不详。本研究应用KA癫痫大鼠为模型,观察癫痫大鼠空间学习记忆功能和脑电图的变化情况,检测癫痫大鼠海马组织中Bax、bcl-2基因的表达情况,探讨α-细辛醚在抗癫痫方面的作用机制。方法：50只雄性SD大鼠随机分为两组,分别为正常对照组（n=10）和癫痫模型组（n=40）。模型组再随机分为4组,每组10只,分别为KA组、α-细辛醚低浓度组（6mg/kg）、中浓度组（12mg/kg）和高浓度组（24mg/kg）。α-细辛醚组连续给药10d,每天经腹腔注射给药一次,第10d取材。癫痫模型组以红藻氨酸（Kainic acid, KA）侧脑室注入诱发大鼠癫痫发作。1.脑电图（electroencephalogram, EEG）观察：各组大鼠在造模后应用数字化脑电图仪连续进行30min EEG描记。观察各组大鼠EEG痫性丛状放电波发生频率,振幅变化和每一丛状放电波中峰电位数目（number of spikes in... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

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目录
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摘要
ABSTRACT
前言
技术路线
第一部分：α-细辛醚对KA癫痫大鼠脑电图的影响
    1. 实验材料
        1.1. 主要的实验仪器与设备
        1.2. 主要实验药品与试剂
        1.3. 实验动物
    2. 方法
        2.1. 模型建立与给药
        2.2. EEG描记
        2.3. 统计学处理
    3. 结果
        3.1. 模型建立
        3.2. EEG观察
    4. 讨论
第二部分：α-细辛醚对KA致癫痫大鼠空间学习记忆功能的影响
    1. 实验材料
        1.1. 主要的实验仪器与设备
        1.2. 主要实验药品与试剂
        1.3. 实验动物与分组
    2. 方法
        2.1. 模型建立与给药
        2.2. 斜板试验
        2.3. 悬吊试验
        2.4. Morris水迷宫试验
        2.5. 统计学处理
    3. 结果
        3.1 模型建立
        3.2. 斜板试验
        3.3. 悬吊试验
        3.4. Morris水迷宫试验
    4. 讨论
第三部分：基于细胞凋亡调节因子Bax、bcl-2的α-细辛醚对癫痫神经元保护机制的研究
    1. 实验材料
        1.1. 主要的实验仪器与设备
        1.2. 主要实验药品与试剂
        1.3. 实验动物与分组
    2. 方法
        2.1. 模型建立与给药
        2.2. 免疫荧光化学法检测Bax、bcl-2蛋白的表达
            2.2.1. 组织石蜡包埋
            2.2.2. 免疫荧光实验步骤
            2.2.3. 荧光数据分析
        2.3. 荧光定量PCR法检测Bax、bcl-2基因的表达
            2.3.1. mRNA的提取和cDNA的合成
                2.3.1.1. 提取RNA
                2.3.1.2 样品RNA纯度检测
                2.3.1.3. 样品RNA逆转录反应(cDNA合成)
            2.3.2. 引物的设计与合成与反应体系的优化
                2.3.2.1. 引物的设计与合成
                2.3.2.2. 反应体系优化
            2.3.3 RT-PCR反应
        2.4. 统计学处理
    3. 结果
        3.1. 模型建立与EEG监测
        3.2. Bax、bcl-2蛋白的表达
        3.3. Bax、bcl-2mRNA的表达
    4. 讨论
综述：中药石菖蒲及其主要成分α-细辛醚的研究进展
    第一节：石菖蒲
        1. 中药属性
        2. 药理
            2.1. 中药论证
            2.2. 近代药理
        3. 毒理
        4. 化学
    第二节：α-细辛醚
        1. 化学结构式
        2. 药物代谢动力学
        3. 药理
    小结
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]石菖蒲α-细辛醚对Lithium-Pilocarpine癫痫模型GABA系统的调控作用[J]. 苗静琨,陈启雄,吴小玫,张晓萍.  中国药理学通报. 2011(08)
[2]细辛脑注射液对槐定碱致痫大鼠Caspase3及热休克蛋白-70表达的影响[J]. 甄军丽,王维平.  中西医结合心脑血管病杂志. 2010(03)
[3]α-细辛脑的抗惊厥、抗癫痫作用及其机制研究[J]. 韩琳,汤道权,印晓星,高媛媛,魏雅芹.  中国药理学通报. 2009(07)
[4]α-细辛脑防治青霉素诱导大鼠癫痫发作实验研究[J]. 任亮,常陆林,马菲,杜钢军.  中国现代医药杂志. 2009(01)
[5]石菖蒲α-细辛醚抗癫痫作用的实验研究[J]. 苗静琨,吴小玫,陈启雄,张晓萍.  中国药理学通报. 2008(12)
[6]石菖蒲的化学成分与药理研究进展[J]. 陈乐真,屠凌岚.  浙江实用医学. 2008(03)
[7]Effects of acrous gramineus and its component, alpha-asarone, on apoptosis of hippocampal neurons after seizure in immature rats[J]. Libin Yang1, Shulei Li2, Yanzhi Huang3, Jianmin Liang1, Yuhong Wang4 1Department of Pediatrics, the First Hospital of Jilin University, Changchun 130021, Jilin Province, China 2Department of Histology and Embryology, Norman Bethune Medical School, Jilin University, Changchun 130021, Jilin Province, China 3Department of Internal Medicine, Children Hospital of Changchun City, Changchun 130061, Jilin Province, China 4Department of Neurology, the First Clinical Hospital affiliated to Harbin Medicine University, Harbin 150001, Heilongjiang Province, China.  Neural Regeneration Research. 2008(01)
[8]红藻氨酸致癎大鼠神经元凋亡的动态研究[J]. 吴原,庞家容,郑金瓯,邓晓清,梁秀琳,李佳荃,陈志颖.  临床神经电生理学杂志. 2007(03)
[9]氨己烯酸对自发性癫痫大鼠小发作和大发作的作用[J]. 聂宏光,蔡际群,姚维范.  中国药理学通报. 2007(05)
[10]石菖蒲的研究进展[J]. 吕刚,李婷婷.  时珍国医国药. 2006(07)



本文编号：3594189