基于稳定同位素标记蛋白组方法探究成年天使综合症小鼠差异表达蛋白

发布时间：2022-01-19 06:15

　　天使综合症由15号染色体q11-q13区段上母源性UBE3A基因缺失或失活突变,同时父源基因不表达引起,主要表现为智力、行动、言语等方面缺陷。Ube3a^m-/p+小鼠作为天使综合症的模式小鼠,从幼年到成年均出现行为学异常,我们利用稳定同位素标记小鼠SILAM方法以探究其信号通路及差异表达的蛋白。本课题围绕成年小鼠进行探索,通过组学手段发现并证实了成年AS小鼠脑中核糖体蛋白增多的现象,采用qPCR方法对其中显著增加的核糖体蛋白进行检测,mRNA在转录水平无变化,翻译状态的mRNA增加。同时发现核糖体蛋白的增加和18S、28S rRNA的增加促进了蛋白的合成通路S6K和eIF2α的磷酸化,进而通过UPR信号通路影响内质网应激。综上所述,我们分析了成年AS小鼠中差异表达蛋白并且对这种年龄依赖的核糖体相关的生物学效应进行了探究,这些发现为天使综合症的发病机制研究提供了新的角度。 

【文章来源】：华东师范大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

1-1常见神经发育性疾病及发病率[8]

华东师范大学 2019 届硕士学位论文年代，发现大多数 AS 患者的 15 号染色体 11 到 13 区域的微缺失，从而揭示了AS 与 15 号染色体的因果关系。在 1997 年，UBE3A 基因被确认为天使综合症中异常的基因座[10]。人类遗传学研究表明，天使综合症主要由以下四种类型的分子机制引起：15 号染色体上 q11-q13 区域内母源性 UBE3A 基因缺失，占比约 70-80%；15 号染色体上 q11-q13 区域内母源性 UBE3A 基因突变，占比约 10-20%；15 号染色体上 q11-q13 区域内为父源二体，占比约 3-5%；15 号染色体上 q11-q13 区域内父系遗传 UBE3A 被印记，占比约 3-5%。UBE3A 基因只在脑中父系印记，在其他组织中进行双等位表达[11]。

最常见和最严重的行为之一，行为包括烦躁不安，容易注意力分散，无法静坐，过度活动，多动行为随着年龄的增长而减少[14]；患病儿童表现出许多自闭症的重叠特征，显著语言缺陷和一些刻板行为，与自闭症不同的是，天使综合症患者喜欢被周围其他人沟通[15]；41%的患者存在活动性癫痫发作，与 16-20 岁的人相比，25 岁以上人癫痫发作的频率和程度增加。癫痫发作在儿童早期最严重，在成年期也可复发；72%的患者有睡眠潜伏期增加，夜间醒来次数等睡眠障碍；85%的患者存在便秘，32%的患者出现超重或肥胖，52%的患者表现出了自我伤害行为[12]。天使综合症小鼠模型（母源性 Ube3a 缺陷型, Ube3am-/p+）的异常表型与患者有许多相似的临床症状，包括认知及运动异常等。AS 小鼠的表型在品系、年龄中有差异。通过研究特定的表型，这些表型将成为天使综合症临床药物筛选的最佳目标[16]。


本文编号：3596357