IL-4介导JAK1/STAT6通路诱导小鼠脑出血后M2型小胶质细胞极化发挥神经保护作用
发布时间：2022-01-26 02:39
目的:探讨IL-4是否介导JAK1/STAT6通路促进小胶质细胞向M2型极化,减轻脑出血后炎症反应和减少神经细胞凋亡以促进神经功能损伤恢复?方法:1.通过建立凝血酶诱导BV2细胞分化模型,使用CD16/32作为M1型小胶质细胞的标志物,CD206作为M2型的标志物,利用免疫荧光方法检测Iba-1+CD16/32、Iba-1+CD206荧光蛋白表达共定位,明确BV2细胞是否在凝血酶诱导后被激活,且分别检测出两组标记物共定位表达各自相对荧光强度。再将凝血酶诱导后的BV2细胞分为四组:（1）Control组:仅凝血酶诱导BV2细胞分化模型组;（2）Thr+PBS组:凝血酶诱导BV2细胞分化模型的PBS组;（3）Thr+IL-4组:凝血酶诱导BV2细胞分化模型的IL-4组;（4）IL-4+AG组:凝血酶诱导BV2细胞分化模型的IL-4和AG-490组。利用Western blot方法检测p-JAK1、JAK1、p-STAT6和STAT6等通路蛋白的表达水平,利用免疫荧光技术检测BV2细胞中Iba-1+CD16/32和Iba-1+CD206共定位表达细胞相对荧光强度。2.利用胶原酶VII建立小鼠...
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
利用胶原酶VII建立C57BL/6小鼠脑出血模型，建模成功后手术组和假手术组实物图
图 2 体外实验中，IL-4 对 BV2 细胞极化过程的作用结果。（注：A 免疫荧光染色测量不同极化亚型 BV2 细胞的荧光蛋白 Iba-1+CD16/32 和 Iba-1+CD206 表达共定位的相对荧光强度；B 与 Thr+PBS组相比，Thr+IL-4 组细胞中 Iba-1+CD16/32 荧光蛋白表达共定位的相对荧光强度显著减弱，而细胞中 Iba-1+CD206 荧光蛋白表达共定位的相对荧光强度显著增强，并且给予 AG-490 处理后上述结果被明显逆转，且差异均具有统计学意义，*P < 0.05；n = 5，比例尺 = 50μm。）Fig. 2 Effect of IL-4 on BV2 microglial polarization in vitro. (A) The phenotypes of BV2 cells weredetected by the relative fluorescent intensity of Iba-1 + CD16/32 costaining and Iba-1 + CD206 costaining.(B) Iba-1 + CD16/32 cells were significantly decreased in the Thr+IL-4 group compared with those in theThr+PBS group. Furthermore, the relative intensity of Iba-1 + CD206 cells in the thr+IL-4 group wassignificantly higher than that in the PBS group. However, this result was reversed by using AG-490. Dataare the means ±SD (*P < 0.05; n = 5). Scale bar = 50 μm.2.2 IL-4 激活凝血酶诱导的 BV2 细胞中 JAK1/STAT6 信号通路
遵义医科大学硕士学位论文 何 洋实验检测了 p-JAK1、JAK1、p-STAT6 和 STAT6 四个通路蛋白。结果表明，脑出血后，JAK1/STAT6 通路被激活，与 Control 组相比，Thr+PBS 组中p-JAK1/ JAK1、p-STAT6/ STAT6 水平无明显差异；与 Control 组和 Thr+PBS组相比，Thr+IL-4 组中 p-JAK1/JAK1 和 p-STAT6/STAT6 的表达水平明显上调；然而，在 IL-4+AG 组中，p-JAK1/JAK1 和 p-STAT6/STAT6 的表达水平较 Thr+IL-4 组中明显下调，差异具有统计学意义（*P < 0.05；n = 6）（如图 3）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]脊髓损伤后IL-4促使小胶质细胞和巨噬细胞在组织修复和功能恢复中发挥作用[J]. 王晶,Francos-Quijorna I,Amo-Aparicio J,Martinez-Muriana A,López-Vales R. 神经损伤与功能重建. 2016(06)
本文编号：3609646
【文章来源】：遵义医科大学贵州省
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
利用胶原酶VII建立C57BL/6小鼠脑出血模型，建模成功后手术组和假手术组实物图
图 2 体外实验中，IL-4 对 BV2 细胞极化过程的作用结果。（注：A 免疫荧光染色测量不同极化亚型 BV2 细胞的荧光蛋白 Iba-1+CD16/32 和 Iba-1+CD206 表达共定位的相对荧光强度；B 与 Thr+PBS组相比，Thr+IL-4 组细胞中 Iba-1+CD16/32 荧光蛋白表达共定位的相对荧光强度显著减弱，而细胞中 Iba-1+CD206 荧光蛋白表达共定位的相对荧光强度显著增强，并且给予 AG-490 处理后上述结果被明显逆转，且差异均具有统计学意义，*P < 0.05；n = 5，比例尺 = 50μm。）Fig. 2 Effect of IL-4 on BV2 microglial polarization in vitro. (A) The phenotypes of BV2 cells weredetected by the relative fluorescent intensity of Iba-1 + CD16/32 costaining and Iba-1 + CD206 costaining.(B) Iba-1 + CD16/32 cells were significantly decreased in the Thr+IL-4 group compared with those in theThr+PBS group. Furthermore, the relative intensity of Iba-1 + CD206 cells in the thr+IL-4 group wassignificantly higher than that in the PBS group. However, this result was reversed by using AG-490. Dataare the means ±SD (*P < 0.05; n = 5). Scale bar = 50 μm.2.2 IL-4 激活凝血酶诱导的 BV2 细胞中 JAK1/STAT6 信号通路
遵义医科大学硕士学位论文 何 洋实验检测了 p-JAK1、JAK1、p-STAT6 和 STAT6 四个通路蛋白。结果表明，脑出血后，JAK1/STAT6 通路被激活，与 Control 组相比，Thr+PBS 组中p-JAK1/ JAK1、p-STAT6/ STAT6 水平无明显差异；与 Control 组和 Thr+PBS组相比，Thr+IL-4 组中 p-JAK1/JAK1 和 p-STAT6/STAT6 的表达水平明显上调；然而，在 IL-4+AG 组中，p-JAK1/JAK1 和 p-STAT6/STAT6 的表达水平较 Thr+IL-4 组中明显下调，差异具有统计学意义（*P < 0.05；n = 6）（如图 3）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]脊髓损伤后IL-4促使小胶质细胞和巨噬细胞在组织修复和功能恢复中发挥作用[J]. 王晶,Francos-Quijorna I,Amo-Aparicio J,Martinez-Muriana A,López-Vales R. 神经损伤与功能重建. 2016(06)
本文编号：3609646
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/shenjingyixue/3609646.html
最近更新
教材专著
