Ataxin-3的亚细胞定位及其对细胞器形态的影响

发布时间：2022-01-26 04:38

　　目的：本实验通过研究野生型和polyQ扩展突变型ataxin-3蛋白在细胞内的亚细胞定位及ataxin-3蛋白的polyQ扩展突变对线粒体、高尔基体和内质网形态的影响,以期更深入地了解ataxin-3的生物学功能及突变型ataxin-3蛋白的可能毒性作用机制。方法：用Lipofectamine2000脂质体将GFP-ataxin-3融合蛋白表达载体pEGFP-N1-MJD20Q/68Q转染入Hela细胞。转染24小时后采用间接免疫荧光法用红色荧光染料分别标记识别线粒体、高尔基体和内质网膜的标记蛋白TOM20、GM130、calnexin.在激光共聚焦显微镜下观察ataxin-3蛋白是否与各细胞器共定位及ataxin-3蛋白的polyQ扩展突变对线粒体、高尔基体和内质网形态的影响。结果：1.ataxin-3蛋白与线粒体标记蛋白TOM20无共定位,但表达polyQ扩展型ataxin-3组线粒体碎裂细胞百分比增加（P<0.05）。2.ataxin-3蛋白与高尔基体标记蛋白GM130无共定位信号且扩展突变型ataxin-3也不引起高尔基体碎裂。3.野生型和polyQ扩展型ataxin-3... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略词表
1 前言
2 仪器与材料
    2.1 主要仪器
    2.2 主要试剂与耗材
    2.3 主要溶液配制
3 实验方法
    3.1 质粒扩增、抽提
    3.2 Hela细胞的培养
    3.3 质粒转染Hela细胞
    3.4 免疫荧光-激光共聚焦检测
4 结果
    4.1 质粒酶切鉴定及在细胞内表达
    4.2 ataxin-3与细胞器的激光共聚焦结果
        4.2.1 ataxin-3与线粒体
        4.2.2 ataxin-3与高尔基体
        4.2.3 ataxin-3与内质网
5 讨论
    5.1 ataxin-3蛋白与线粒体
    5.2 ataxin-3蛋白与高尔基体
    5.3 ataxin-3蛋白与内质网
6 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]ataxin-3相互作用蛋白的筛选及鉴定（英文）[J]. 沈璐,汤建光,唐北沙,江泓,赵国华,夏昆,张玉虎,蔡芳,谭利明,潘乾.  中华医学遗传学杂志. 2005(03)



本文编号：3609830