雌激素对脑缺血再灌注损伤神经元的保护作用及机制探讨

发布时间：2022-02-17 20:48

　　目的：1.研究雌激素（17-β雌二醇,E2）对氧糖剥夺/复氧复糖（oxygen-glucose deprivation/reoxygenation, OGD/R）大鼠皮层神经元的影响并探讨其作用机制。2.研究E2对大鼠脑缺血再灌损伤的作用并初步观察其作用机制。方法：选择原代培养的Sprague-Dawley （SD）大鼠大脑皮层神经元,通过测定LDH漏出率和MTT比色法检测细胞活力作为评价指标,建立体外OGD/R损伤模型。在此基础上,通过LDH漏出率的测定、MTT比色法、流式细胞术、Hoechst33342染色观察E2对皮层神经元OGD/R损伤的影响,RT-PCR、Western blotting、荧光活性测定和Fura-2/AM荧光探针标记等方法探讨Ca2+/calpain/caspase12介导的凋亡途径在E：神经保护中的作用。雌性SD大鼠行卵巢切除术排除内源性E2的干预,通过大脑中动脉线栓法建立脑缺血再灌损伤模型,通过神经功能评分、TTC染色、脑梗塞体积计算评价模型稳定性,TUNEL染色,免疫组织化学染色和荧光定量法测定caspase12活性,观察E2对缺血再灌神经细胞凋亡的影响... 

【文章来源】：中南大学湖南省211工程院校985工程院校教育部直属院校

【文章页数】：111 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词
前言
第一章 E_2对大鼠皮层神经元OGD/R损伤的影响
    1.1 材料与方法
        1.1.1 材料
        1.1.2 方法
    1.2 结果
        1.2.1 神经元培养与鉴定
        1.2.2 E_2受体蛋白的表达
        1.2.3 E_2对OGD/R损伤神经元的影响
    1.3 讨论
    1.4 结论
第二章 E_2对OGD/R损伤皮层神经元的保护作用与Ca~(2+)/calpain/caspase 12凋亡通路的关系
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 结果
        2.2.1 E_2预处理对OGD/R损伤神经元细胞内Ca~(2+)浓度的影响
        2.2.2. E_2对Caspase 12、caspase 7和GRP 78 mRNA水平的影响
        2.2.3 E_2对OGD/R损伤神经元calpain、caspase 12活性的影响
        2.2.4 抑制calpain活性对OGD/R损伤皮层神经元的影响
    2.3 讨论
    2.4 结论
第三章 雌二醇对大鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用
    3.1 材料与方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 结果
        3.2.1 大鼠神经功能评分
        3.2.2 TTC染色和大鼠脑梗塞体积比
        3.2.3 E_2对MCAO大鼠神经元细胞形态的影响
        3.2.4 E_2对MCAO大鼠神经元凋亡的影响
        3.2.5 蛋白含量测定
        3.2.6 E_2对MCAO大鼠procaspase 12蛋白表达和caspase 12活性的影响
    3.3 讨论
    3.4 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
攻读学位期间主要的研究成果


【参考文献】：
博士论文
[1]肝细胞生长因子对神经元缺氧/复氧损伤的影响及其分子机制研究[D]. 贺芳.中南大学 2007



本文编号：3630082