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氯化锂通过上调α5β1整合素的基因表达抑制PC12细胞缺血缺氧型凋亡

发布时间:2022-02-20 15:52
  目的:观察氯化锂对缺氧PC12细胞凋亡的影响,明确氯化锂的脑保护作用,为氯化锂用于临床缺血缺氧性疾病的治疗提供理论依据及研究方向。方法:PC12细胞株由上海市中科院细胞库提供,培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中。当细胞融合度达到70%-80%时传代,取生长对数期细胞用于实验。将PC12细胞在缺氧环境下培养0h,12h,24h,36h后采用Annexin-v FITC/PI双染流式细胞分析仪检测细胞凋亡率;0h为对照组,12h,24h,36h为实验组,观察凋亡高峰时间用于后期实验。PC12细胞分为:A正常组,B缺氧组,C缺氧+氯化锂治疗组,D单独氯化锂组,四组不同方式培养;采用Annexin-v FITC/PI双染流式细胞分析仪检测细胞不同处理条件凋亡率的改变;CAM活细胞染色检测细胞存活率;RT-PCR检测Caspase-3,α5、β1整合素mRNA表达。结果:1、实验组(12h,24h和36h)PC12细胞凋亡率及死亡率明显高于对照组,[23.12±0.048,34.91±0.104,36.58±0.092与4.11±0.081;P<0.05];36h组凋亡率较24h组稍有增加... 

【文章来源】:南昌大学江西省211工程院校

【文章页数】:49 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
中英文缩略词表
第1章 引言
第2章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验细胞
        2.1.2 实验试剂
        2.1.3 试剂配制
        2.1.4 主要仪器和设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 器材准备
        2.2.2 细胞培养
        2.2.3 细胞缺氧培养
        2.2.4 细胞冻存
        2.2.5 细胞复苏
        2.2.6 实验分组及给药方式
        2.2.7 流式细胞仪检测 PC12 细胞凋亡率
        2.2.8 CAM 活细胞染色检测 PC12 存活率
        2.2.9 RT-PCR 检测 Caspase-3,α5 和β1 基因表达
        2.2.10 统计分析
第3章 实验结果
    3.1 缺血缺氧诱导 PC12 细胞凋亡
    3.2 氯化锂抑制缺血缺氧引起的 PC12 细胞凋亡
    3.3 氯化锂促进 PC12 细胞在缺氧条件下的存活
    3.4 氯化锂下调缺氧条件下 PC12 表面 caspase-3mRNA 的表达,上调α5 和β1mRNA 的表达
第4章 讨论
第5章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 进一步工作的方向
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号:3635370

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