干细胞移植对MCAO模型鼠脑组织miR-34a及Survivin表达的影响

发布时间：2017-05-14 06:08

  本文关键词：干细胞移植对MCAO模型鼠脑组织miR-34a及Survivin表达的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究缺血再灌注损伤后大鼠脑组织mi R-34a、Survivin的表达水平,探讨BMSCs移植的抗凋亡和神经保护作用。方法:1.构建模型:选取体重约250-300g左右的健康雄性SD大鼠,采用改良Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(middlecerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型。2.成功模型的判定:5分制评分法评分,1-3分的为造模成功模型,TTC染色验证脑组织梗死范围。3.实验分组:符合实验纳入条件的大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、PBS液移植组、干细胞移植组。干细胞移植组和PBS液移植组于造模成功后分别通过尾静脉注射1ml(含有l×l06个)骨髓间充质干细胞和1ml PBS液,B组造模后无特殊处理,A组不做处理。各组分别于造模成功后12h、1d、3d、7d观察相关指标的变化。4.观测指标:改良大鼠神经功能缺损评分(m NSS)评估神经功能缺损;免疫组化检测Survivin的表达;实时荧光定量PCR技术检测mi R-34a的表达。结果:1.根据5分制评分法评估,造模成功率为72.22%。最终可用于相关指标检测的实验动物成功率为54.17%。2.神经功能缺损评分显示:在12h、1d、3d、7d时间点,空白对照组:0±0.00;模型对照组:9.83±2.04、15.17±1.47、12.17±2.23、10.83±1.47;PBS液移植组:9.67±1.97、15.00±1.67、12.00±2.10、11.00±2.37;干细胞移植组:10.00±2.53、13.33±2.16、8.33±1.21、6.83±0.75。模型组、PBS液移植组、干细胞移植组在各时间点均高于空白对照组(P0.01);模型组与PBS液移植组比较无明显差异(P0.05);12h、1d时干细胞移植组与模型组、PBS液移植组比较无明显差异(P0.05);3d、7d时干细胞移植组明显低于模型组和PBS液移植组(P0.05)。3.免疫组化结果显示:Survivin阳性细胞率(%)在12h、1d、3d、7d时间点,空白对照组:0±0.00;模型对照组:11.00±2.61、19.17±3.76、31.00±3.03、13.00±2.61;PBS液移植组:10.67±2.16、20.00±3.46、32.33±4.18、14.33±3.14;干细胞移植组:16.33±2.16、29.00±5.48、44.83±3.76、25.00±4.60。模型组、PBS液移植组、干细胞移植组在各时间点均明显高于空白对照组(P0.01);模型组与PBS液移植组无明显差异(P0.05);干细胞移植组在各时间点均显著高于模型组和PBS液移植组(P0.05)。4.实时荧光定量PCR结果显示:mi R-34a表达量在12h、1d、3d、7d时间点,空白对照组:1.1187±0.1241;模型对照组:4.7698±0.2569、3.7305±0.2985、3.0697±0.2067、2.6898±0.1998;PBS液移植组:4.7388±0.2147、3.7705±0.2378、2.9782±0.2153、2.6682±0.1879;干细胞移植组:4.0532±0.2082、2.8338±0.2391、2.5525±0.1101、2.0438±0.2608。模型组、PBS液移植组、干细胞移植组在各时间点均明显高于空白对照组(P0.01);模型组与PBS液移植组无明显差异(P0.05);干细胞移植组在各时间点均显著低于模型组和PBS液移植组(P0.01)。结论:1.干细胞移植可改善脑缺血—再灌注大鼠的神经功能,对缺血性脑损伤具有一定的保护作用。2.大鼠脑缺血—再灌注损伤可致病灶区mi R-34a的表达上调;移植干细胞可能通过下调病灶区mi R-34a、上调Survivin的表达发挥抗凋亡作用。
【关键词】：脑缺血再灌注 干细胞移植 miR-34a Survivin 抗凋亡
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R743
【目录】：

• 摘要4-7
• Abstract7-11
• 主要英文缩略语11-14
• 第1章 绪论14-28
• 1.1 干细胞及细胞移植的国内外研究现状14-21
• 1.2 缺血性脑损伤中Survivin蛋白表达的变化及其意义21-22
• 1.3 micro RNA分子可能通过影响相关蛋白质的生成调节疾病的进展和康复22-26
• 1.4 本实验的主要内容26-28
• 第2章 材料与方法28-42
• 2.1 主要仪器与试剂28-30
• 2.2 实验动物及分组30-31
• 2.3 实验模型的构建及成功模型的判定31-32
• 2.4 尾静脉注射法行干细胞移植32-34
• 2.5 标本的制备34-35
• 2.6 评估及检测方法35-41
• 2.7 统计学处理41-42
• 第3章 实验结果42-50
• 3.1 大脑中动脉缺血-再灌注模型的制备42-43
• 3.2 神经功能缺损评分结果43-44
• 3.3 免疫组化结果44-46
• 3.4 实时荧光定量PCR结果46-50
• 第4章 讨论50-58
• 第5章 结论58-60
• 参考文献60-64
• 综述64-71
• 参考文献68-71
• 攻读学位期间的科研成果71-72
• 致谢72

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本文编号：364420