人脐带间充质干细胞移植治疗脑缺血损伤大鼠的实验研究

发布时间：2022-05-10 18:45

　　目的：研究人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）尾静脉移植对大鼠缺血性脑损伤后神经功能恢复的影响,并探讨其可能的治疗机制,为缺血性脑血管病的临床治疗提供更多有价值的实验依据和方法。方法：用密度梯度离心结合贴壁筛选法分离、培养hUC-MSCs,移植前以10mg/L的BrdU进行标记。采用改良线栓法制作SD大鼠大脑中动脉闭塞模型,以TTC法判断脑缺血的部位和范围。根据Zea Longa神经功能缺损评分将符合标准的80只脑缺血模型大鼠随机分为3组（移植A组、移植B组、模型组）。移植A组在造模后7天通过尾静脉方法将BrdU标记的1x106个hUC-MSCs移植入大鼠体内,移植B组在造模后14天通过尾静脉移植同等剂量的hUC-MSCs,模型组不作处理。在移植后第7,14,21,28,35,42,49,56天采用mNSS神经功能损伤程度评分法检测大鼠神经系统功能恢复情况。移植后第3天分批取大鼠脑组织行免疫组化染色观察CDllb、MPO阳性细胞。移植后第60天观察移植后hUC-MSCs在大鼠脑内存活及分化情况：Brdu+Nestin、Brdu+MAP-2、 Brdu+GFAP、Brdu+FⅧ、Brd... 

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究背景
    研究目的、方法
一、人脐带间充质干细胞培养、鉴定及标记
    1.1.对象和方法
        1.1.1 实验材料、试剂及仪器设备
            1.1.1.1 实验材料
            1.1.1.2 主要实验试剂
            1.1.1.3 主要实验仪
        1.1.2
            1.1.2.1 hUC-MSCs的分离和原代培养
            1.1.2.2 hUC-MSCs的传代培养与扩增
        1.1.3 hUC-MSCs细胞表型检测
        1.1.4 BrdU标记
    1.2 结果
        1.2.1 hUC-MSCs细胞形态学观察
        1.2.2 hUC-MSCs细胞免疫表型检测
    1.3 讨论
        1.3.1 MSCs培养材料来源的选择
        1.3.2 hUC-MSCs的分离和培养
        1.3.3 hUC-MSCs免疫表型鉴定
    1.4 小结
二、MCAO模型的制作及评分
    2.1 对象和方法
    2.2 结果
    2.3 讨论
    2.4 小结
三、人脐带间充质干细胞移植治疗MCAO大鼠
    3.1 材料和方法
        3.1.1 试剂及仪器设备
        3.1.2 hUC-MSCs移植操作步骤
        3.1.3 mNSS评分测试行为学
        3.1.4 实验动物灌注处死
        3.1.5 脑组织病理学检查
        3.1.6 统计学分析
    3.2 结果
        3.2.1 大鼠大体观察
        3.2.2 mNSS评分改变
        3.2.3 病理学检查结果
    3.3 讨论
    3.4 讨论
小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    综述1 人月齐带间充质干细胞的实验研究进展
        参考文献
    综述2 间充质干细胞治疗缺血性脑卒中的研究进展
        参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Influence of acupuncture on neural movement function in rats with middle cerebral artery occlusion-A randomized controlled trial[J]. 常晓波,樊小农,王舒,杨沙,杨雪,张亚男,石学敏.  Journal of Traditional Chinese Medicine. 2012(01)
[2]脐血间充质干细胞治疗大鼠脑缺血性损伤的实验研究[J]. 赵迪诚,杜鹃,陈红,卢连梅,苏江.  中华全科医学. 2012(02)
[3]人胎盘源间充质干细胞对脐血CD8+T细胞活化及周期和IL-17分泌的影响[J]. 王国艳,张思英,李广云,王斐斐,都海波,栾希英.  细胞与分子免疫学杂志. 2012(01)
[4]壳聚糖/亚磷酸化壳聚糖复合海绵复合人脐带间充质干细胞用于异位成骨的实验研究[J]. 孙国栋,李志忠,焦延鹏,周长忍,焦根龙,林永新.  中国修复重建外科杂志. 2011(12)
[5]人脐带羊膜来源和骨髓来源间充质干细胞的免疫调控特征比较[J]. 徐曼,刘元林,陈晨,廖丽,张毅,陈虎.  中国实验血液学杂志. 2011(05)
[6]Treatment of Cerebral Ischemia with Combination of Bone Marrow-Derived Mesenchymal Stem Cells and Chinese Medicine[J]. 关莹,赵永华.  Chinese Journal of Integrative Medicine. 2011(09)
[7]不同数量BMSCs对大鼠背根神经节生长影响的实验研究[J]. 许文静,赵喆,赵斌,王玉,彭江,张莉,陈继凤,卢世璧.  中国修复重建外科杂志. 2011(10)
[8]血小板裂解液对人脐带间充质干细胞体外成软骨分化的影响[J]. 冯学涛,田少奇,孙康,张积华,张才龙,刘世海,周明,吕江涛.  中国修复重建外科杂志. 2011(10)
[9]脐带源性和脐血源性间充质干细胞分离培养方法的比较[J]. 管英华,谢扬虎,魏晓巍,李玉云.  中华全科医学. 2011(09)
[10]人脐带间充质干细胞的生物学特性和超微结构[J]. 朱少芳,何援利,付霞霏.  中国医学科学院学报. 2011(04)



本文编号：3652490