RNA干扰下调CIB1表达对胶质母细胞瘤U87细胞生物学特性的影响

发布时间：2022-07-16 14:49

　　目的：1.构建靶向钙整合素结合蛋白1（calcium-and integrin-binding protein,CIB1）的慢病毒表达载体pGV-siCIB1。2.研究RNA干扰下调CIB1表达对胶质母细胞瘤U87细胞的生长、凋亡、迁移的作用，并探讨其可能的作用机制。方法：1.针对CIB1基因序列（NM₀06384），利用RNA干扰序列的设计原则，设计针对CIB1的RNAi序列，合成单链DNAoligio，退火配对产生双链，通过其两端所含的酶切位点直接连入酶切后的RNAi慢病毒载体上；将连接产物转入制备好的细菌感受态细胞，PCR鉴定阳性重组子后，测序验证，测序结果经比对确认正确的克隆即为构建成功的CIB1基因RNA干扰慢病毒表达载体pGV-siCIB1。2.将慢病毒表达载体感染293T细胞，进行病毒的包装、纯化、浓缩及病毒滴度的测定。以EGFP为报告基因,分别以MOI值1,5,10,100感染细胞，观察感染后48h、72h、96h的感染效率，确定最佳感染时间以及MOI值。3.采用MTT法检测RNAi后CIB1对U87细胞生长的影响；流式细胞仪检测细胞周期和凋亡；划... 

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
缩略语表
中文摘要
Abstract
前言
实验一 靶向钙整合素结合蛋白 CIB1 基因慢病毒表达载体的构建及滴度测定
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
实验二 RNA 干扰下调 CIB1 基因表达对胶质母细胞瘤U87细胞生物学特性的影响
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]非小细胞肺癌组织COX-2和p53表达及其临床意义的研究[J]. 宋娜,金波,刘云鹏,于萍.  中华肿瘤防治杂志. 2008(16)
[2]肿瘤干细胞特性研究进展[J]. 冯海凉,刘玉琴.  肿瘤防治研究. 2008(03)



本文编号：3662714