神经紧张素及其受体NTSR1在胶质瘤增殖和迁移中的作用及机制研究
发布时间：2022-08-10 15:42
脑胶质瘤（glioma）是人最常见的一种颅内原发恶性脑肿瘤,其最大特性就是具有侵袭性的生长方式,较容易侵入到周围正常脑组织,因此很难通过外科手术彻底清除肿瘤组织。与此同时,手术刺激还可能会诱导肿瘤组织脱离瘤体,进一步加深胶质瘤在正常脑组织中的侵袭程度。针对术后残留的肿瘤细胞,主要采用放疗、化疗等措施来加以杀灭,然而这些术后残留的病变组织通常对放疗、化疗等措施表现出较强的抵抗性,导致肿瘤复发,患者预后不佳。鉴于现阶段针对胶质瘤的治疗效果尚不令人满意,我们主要探究胶质瘤细胞增殖和迁移的机制,希望能在胶质瘤形成初期就抑制其增殖与迁移,将胶质瘤控制在一定范围内,避免其侵袭到重要的功能区,以便更好的通过外科手术彻底切除瘤体,尽可能减少对正常组织的损伤。本文首次证实NTS及其1号受体NTSR1在胶质瘤细胞增殖和迁移过程中发挥作用。通过体外实验我们研究了NTS以及NTSR1对胶质瘤细胞系GL261增殖和迁移的影响,利用NTSR1的特异性拮抗剂SR48692处理GL261,分析NTSR1表达受到抑制之后GL261的增殖和迁移过程受到的影响；同时还探讨了该过程所涉及的ERK信号传导途径,即NTSR1激活...
【文章页数】：90 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 概述
1.2 神经紧张素及其受体概述
1.2.1 神经紧张素结构及其生理功能概述
1.2.2 神经紧张素受体种类及生理功能概述
1.3 NTS能促进正常器官生长
1.3.1 胃
1.3.2 小肠
1.3.3 结肠
1.3.4 胰腺
1.3.5 肾上腺
1.4 NTS及其受体对能促进肿瘤增殖生长
1.4.1 胰腺癌
1.4.2 结肠癌
1.4.3 乳腺癌
1.4.4 前列腺癌
1.4.5 肺癌
1.4.6 胃癌
1.5 小结
第二章 引言
2.1 研究背景及意义
2.2 主要内容和技术路线
第三章 NTSR1在胶质瘤组织和细胞的表达以及其对细胞增殖迁移能力的影响
3.1 材料及试剂
3.1.1 材料
3.1.2 主要仪器
3.1.3 主要试剂
3.1.4 主要抗体
3.2 实验方法
3.2.1 免疫组织化学
3.2.2 细胞培养与传代
3.2.3 小鼠NTSR1干扰RNA的设计与载体构建及转染
3.2.4 免疫细胞荧光染色
3.2.5 CCK-8测细胞生长曲线
3.2.6 划痕实验
3.2.7 Transwell细胞穿孔实验
3.2.8 统计学处理
3.3 结果与分析
3.3.1 NTSR1各级别人脑胶质瘤组织以及鼠脑胶质瘤细胞系GL261中的表达
3.3.2 NTSR1对GL261细胞增殖的影响
3.3.3 NTSR1对GL261细胞迁移的影响
3.4 讨论
3.4.1 NTS/NTSR1在鼠胶质瘤细胞系GL261细胞生长演进中的作用和意义
3.4.2 NTSR1横向受体的交叉关联以及研究进一步可能的工作
第四章 小鼠脑胶质瘤模型的建立以及NTSR1对小鼠生存率的影响
4.1 材料及试剂
4.1.1 材料
4.1.2 主要仪器
4.1.3 主要试剂
4.2 实验方法
4.2.1 注射小鼠前期准备工作
4.2.2 C57小鼠颅内移植瘤模型的建立
4.2.3 注射药物
4.2.4 测定小鼠生存率
4.2.5 小鼠大脑切片H.E.染色和免疫组化染色
4.3 结果与分析
4.3.1 C57小鼠生存期对比
4.3.2 C57小鼠大脑切片H.E.染色结果
4.3.3 C57小鼠大脑切片免疫组化染色结果
4.4 讨论
4.4.1 建立小鼠脑胶质瘤模型的作用和意义
4.4.2 研究未完善的工作,存在的问题和进一步可能的工作
第五章 NTSR1激活引起的ERK蛋白磷酸化在胶质瘤细胞增殖与迁移过程中的作用
5.1 材料及试剂
5.1.1 材料
5.1.2 主要仪器
5.1.3 主要试剂
5.1.4 主要试剂配制
5.2 实验方法
5.2.1 细胞样本准备
5.2.2 总蛋白抽提
5.2.3 上样样品准备
5.2.4 SDS-PAGE
5.2.5 免疫显色
5.2.6 条带分析
5.3 结果与分析
5.3.1 NTS、SR48692和NTS-NA影响GL261细胞的ERK1/2蛋白磷酸化的修饰
5.3.2 siRNA对NTSR1干扰之后影响GL261细胞的ERK1/2蛋白磷酸化的修饰
5.4 讨论
5.4.1 ERK1/2在细胞增殖和迁移中的作用
5.4.2 NTSR1下游信号通路的其他癌效应
第六章 结论
参考文献
在读期间发表论文及参研课题情况
致谢
本文编号：3673906
【文章页数】：90 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 概述
1.2 神经紧张素及其受体概述
1.2.1 神经紧张素结构及其生理功能概述
1.2.2 神经紧张素受体种类及生理功能概述
1.3 NTS能促进正常器官生长
1.3.1 胃
1.3.2 小肠
1.3.3 结肠
1.3.4 胰腺
1.3.5 肾上腺
1.4 NTS及其受体对能促进肿瘤增殖生长
1.4.1 胰腺癌
1.4.2 结肠癌
1.4.3 乳腺癌
1.4.4 前列腺癌
1.4.5 肺癌
1.4.6 胃癌
1.5 小结
第二章 引言
2.1 研究背景及意义
2.2 主要内容和技术路线
第三章 NTSR1在胶质瘤组织和细胞的表达以及其对细胞增殖迁移能力的影响
3.1 材料及试剂
3.1.1 材料
3.1.2 主要仪器
3.1.3 主要试剂
3.1.4 主要抗体
3.2 实验方法
3.2.1 免疫组织化学
3.2.2 细胞培养与传代
3.2.3 小鼠NTSR1干扰RNA的设计与载体构建及转染
3.2.4 免疫细胞荧光染色
3.2.5 CCK-8测细胞生长曲线
3.2.6 划痕实验
3.2.7 Transwell细胞穿孔实验
3.2.8 统计学处理
3.3 结果与分析
3.3.1 NTSR1各级别人脑胶质瘤组织以及鼠脑胶质瘤细胞系GL261中的表达
3.3.2 NTSR1对GL261细胞增殖的影响
3.3.3 NTSR1对GL261细胞迁移的影响
3.4 讨论
3.4.1 NTS/NTSR1在鼠胶质瘤细胞系GL261细胞生长演进中的作用和意义
3.4.2 NTSR1横向受体的交叉关联以及研究进一步可能的工作
第四章 小鼠脑胶质瘤模型的建立以及NTSR1对小鼠生存率的影响
4.1 材料及试剂
4.1.1 材料
4.1.2 主要仪器
4.1.3 主要试剂
4.2 实验方法
4.2.1 注射小鼠前期准备工作
4.2.2 C57小鼠颅内移植瘤模型的建立
4.2.3 注射药物
4.2.4 测定小鼠生存率
4.2.5 小鼠大脑切片H.E.染色和免疫组化染色
4.3 结果与分析
4.3.1 C57小鼠生存期对比
4.3.2 C57小鼠大脑切片H.E.染色结果
4.3.3 C57小鼠大脑切片免疫组化染色结果
4.4 讨论
4.4.1 建立小鼠脑胶质瘤模型的作用和意义
4.4.2 研究未完善的工作,存在的问题和进一步可能的工作
第五章 NTSR1激活引起的ERK蛋白磷酸化在胶质瘤细胞增殖与迁移过程中的作用
5.1 材料及试剂
5.1.1 材料
5.1.2 主要仪器
5.1.3 主要试剂
5.1.4 主要试剂配制
5.2 实验方法
5.2.1 细胞样本准备
5.2.2 总蛋白抽提
5.2.3 上样样品准备
5.2.4 SDS-PAGE
5.2.5 免疫显色
5.2.6 条带分析
5.3 结果与分析
5.3.1 NTS、SR48692和NTS-NA影响GL261细胞的ERK1/2蛋白磷酸化的修饰
5.3.2 siRNA对NTSR1干扰之后影响GL261细胞的ERK1/2蛋白磷酸化的修饰
5.4 讨论
5.4.1 ERK1/2在细胞增殖和迁移中的作用
5.4.2 NTSR1下游信号通路的其他癌效应
第六章 结论
参考文献
在读期间发表论文及参研课题情况
致谢
本文编号：3673906
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