胶质瘤中ASPM与MGMT表达及其临床意义

发布时间：2017-05-16 01:01

  本文关键词：胶质瘤中ASPM与MGMT表达及其临床意义，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：通过逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)和免疫组织化学法(Immunohistochemistry, IHC)分别测定人类异常纺锤体样小头畸形相关蛋白基因(Abnormal Spindle-Like Microcephaly, ASPM)及甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase, MGMT)在人脑胶质瘤中的表达情况和表达位点,统计分析二者在人脑胶质瘤中的表达水平与肿瘤病理学分级的相关性,结合术后随访患者生存期数据,验证ASPM作为潜在分子靶点治疗胶质瘤的可行性,为临床开展胶质瘤分子靶向治疗提供理论依据和新策略。方法：收集兰州大学第二医院神经外科经近3年经病理诊断证实的神经胶质瘤病例41例,所有标本取自术中新鲜肿瘤组织,一部分存入洁净冻存管,置于液氮中速冻保存,另一部分置于4%多聚甲醛溶液中固定,并制作石蜡包埋组织标本保存。同时选取经皮质造瘘颅内肿瘤切除术中的正常脑组织10例为对照组。通过使用RT-PCR和IHC检测ASPM、MGMT在纳入病例中的表达水平,采用Gene Tools影像分析软件、SPSS19和GraphPad Prism软件进行数据统计学分析,分析二者表达水平与肿瘤级别、患者生存期的相关性及二者之间表达的相关性。结果：1.41例胶质瘤组织标本经PCR检测ASPMmRNA阳性表达21例,阳性表达率为51.21%,其中Ⅱ级胶质瘤阳性率为27.27%(3/11),Ⅲ级胶质瘤阳性率为53.33%(8/15),Ⅳ级胶质瘤阳性率为66.67%(10/15),但是三组数据间无统计学差异性(P0.05),正常脑组织中未检测到表达。单因素方差检验证实,ASPM mRNA相对表达水平在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级肿瘤之间无统计学差异性(P=0.220.05),T检验显示低度恶性组与高度恶性组之间具有显著差异性(P=0.050.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示ASPM mRNA阳性表达患者生存期小于阴性表达者,经Log-rank和Breslow检验,其差异具有统计学意义(P0.05); ASPM mRNA低度表达患者比中、高度表达患者有更长的中位生存期,但是二者之间无统计学差异性P0.05)。MGMT mRNA在神经胶质瘤组织和正常脑组织中均阳性表达41例,阳性表达率为100%。MGMT的mRNA相对表达量在不同病理学分级和低度、高度恶性组之间均无统计学差异性(P=0.280.05,P=0.170.05)。Spearman相关性分析表明胶质瘤ASPM mRNA表达量与肿瘤病理级别存在正相关性(r=0.3150, P0.05), MGMT mRNA表达量与肿瘤病理分级无相关性(P=0.9110.05), ASPM与MGMT mRNA在神经胶质瘤细胞中表达无相关性(P0.05)。2.免疫组化检测显示ASPM蛋白在不同级别胶质瘤细胞中表达阳性率不同,但无统计学差异性(P0.05),与肿瘤病理学分级无相关性(P0.05)。3.T检验患者低度恶性组、高度恶性组在发病年龄上的区别可知,高度恶性组患者发病年龄明显高于低度恶性组患者,两组数据有显著统计学差异性(P=0.0030.05),其中低度恶性组中位发病年龄为41.09±3.03岁,高度恶性组为52.03+1.79岁, spearman相关性分析可知肿瘤恶性程度与年龄呈正相关(相关系数r=0.445,P=0.0040.05)。结论：LASPMmRNA在神经胶质瘤组织中表达明显高于正常脑组织,肿瘤级别越高,其表达量越高,其蛋白主要表达定位于肿瘤细胞核内,提示ASPM可能参与神经胶质瘤细胞分裂增殖。ASPM mRNA表达阳性患者生存期明显短于阴性表达者,ASPM mRNA中、高度表达患者比低度表达的患者中位生存期更短,提示ASPM表达程度增强可能提示患者预后较差,生存期较短。2.MGMT的mRNA表达程度在不同病理学分级肿瘤中存在异质性,与肿瘤分级无相关性,MGMT表达水平与胶质瘤恶性程度无关。3.胶质瘤ASPM与MGMT在基因和蛋白层面表达无相关性,提示ASPM可能与MGMT引起的肿瘤化疗耐药及耐药所致的生存期缩短无关。4.胶质瘤患者发病年龄越高,其肿瘤恶性程度可能越高。
【关键词】：胶质瘤 ASPM MGMT 聚合酶链式反应 生存期 免疫组织化学
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.41
【目录】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-8
• 英文缩略词表8-11
• 前言11-17
• 1.1 研究背景11-13
• 1.1.1 胶质瘤的分类12
• 1.1.2 胶质瘤的发病机制12-13
• 1.2 ASPM和MGMT研究进展13-17
• 1.2.1 ASPM研究进展13-15
• 1.2.2 MGMT研究进展15-17
• 实验方法17-25
• 2.1 材料与方法17-25
• 2.1.1 研究对象17-18
• 2.1.2 实验条件及实验原理与步骤18-24
• 2.1.3 实验结果判定及统计学分析24-25
• 实验结果与统计分析25-31
• 3.1 RT-PCR检测ASPM、MGMT表达结果25-26
• 3.2 免疫组化法检测ASPM表达结果26-28
• 3.3 ASPM在胶质瘤中的阳性表达与患者生存期的关系28-30
• 3.4 肿瘤恶性程度与发病年龄的关系30-31
• 讨论31-36
• 4.1 ASPM与神经胶质瘤31-33
• 4.1.1 ASPM在胶质瘤中的表达情况分析31-32
• 4.1.2 ASPM在胶质瘤研究中的临床应用价值32-33
• 4.2 MGMT与神经胶质瘤33-34
• 4.2.1 MGMT的表达与神经胶质瘤的关系33
• 4.2.2 MGMT在胶质瘤研究中的临床应用价值33-34
• 4.3 ASPM与MGMT的表达关系34-35
• 4.4 发病年龄与肿瘤恶性程度35-36
• 结论36-37
• 参考文献37-40
• 文献综述40-54
• 综述参考文献50-54
• 在学期间研究成果54-55
• 致谢55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 仇志坤;冯冰虹;陈忠平;;MGMT在神经胶质瘤中表达的研究进展[J];中国神经肿瘤杂志;2010年01期

2 梁振;牛华涛;罗林;;MGMT在脑胶质瘤中的表达及其意义[J];科协论坛(下半月);2012年05期

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本文编号：369237