CX3CR1对缺血再灌注小鼠小胶质细胞调控的研究
发布时间:2017-05-16 16:17
本文关键词:CX3CR1对缺血再灌注小鼠小胶质细胞调控的研究,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:观察不同时间点的脑缺血再灌注小鼠病灶区小胶质细胞的数量和形态的变化,探讨CX3CR1对小胶质细胞的影响。方法:1.将25只野生型(Wild-type,WT) C57BL/6小鼠进行随机分组:6h组、12h组、24h组、48h组、72h组,每组5只,建立小鼠脑缺血再灌注模型。2.术后进行神经功能缺失评分。在术后6h、12h、24h、48h、72h处死小鼠并灌注取脑,石蜡包埋切片,HE染色观察并分析脑梗死面积情况;免疫组织化学方法行anti-Iba1(小胶质细胞/外周血巨噬细胞特异性标志物)染色,动态观察梗塞侧皮层、半暗带、纹状体、海马4个部位及对侧的相同部位,计算每侧小胶质细胞的数量,观察细胞形态。3.选梗死面积和小胶质细胞数量最多的时间组进行WT小鼠和CX3CR1基因敲除(Knock-out, KO) C57BL/6小鼠进行对比,分析脑梗死面积和小胶质细胞的数量。结果:1.WT小鼠从术后苏醒、6h、12h、24hh、48h、72h神经功能缺失评分逐渐升高。2.HE染色确定小鼠脑缺血再灌注模型制作成功,WT小鼠脑梗死面积在6h、12h、24h、48h、72h时间轴上逐渐增多,6h、12h、24h组间统计分析有显著差异性(P0.05),24h、48h、72h各组间无统计学差异(P0.05)。在72h,WT小鼠脑梗死面积比KO小鼠多,且有显著的统计学差异(P0.05)。3.WT小鼠小胶质细胞数量梗死侧较对侧多,且有显著的统计学差异(P0.05);梗死侧WT小鼠小胶质细胞数量在6h、12h、24h、48h、72h时间轴上逐渐增多,除48h和72h组间统计分析无差异性,其余各组均有差异性(P0.05)。WT小鼠12h、24h、48h、72h梗死侧的小胶质细胞阿米巴样改变明显。在72h,WT小鼠脑梗死侧小胶质细胞数量比KO小鼠多,且有显著的统计学差异(P0.05)。结论:1.WT小鼠脑缺血再灌注后6h、12h、24h、48h、72h,梗死侧的小胶质细胞数量逐渐增多,并且与梗死面积和神经功能缺失评分显著性正相关。2.在缺血再灌注的早期,CX3CR1信号缺失可以减少脑缺血再灌注小鼠的小胶质细胞数量和脑梗死面积。3.抑制CX3CR1信号表达表现出保护神经的作用,可以作为脑缺血早期的治疗方法。
【关键词】:CX3CR1 Fractalkine 小胶质细胞 脑缺血 再灌注损伤
【学位授予单位】:昆明医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R743
【目录】:
- 中文摘要6-8
- Abstract8-10
- 中英文缩略词表10-12
- 引言12-17
- 材料与方法17-30
- 1. 材料17-21
- 1.1 主要仪器设备17-18
- 1.2 主要实验试剂及材料18-19
- 1.3 实验动物19-20
- 1.4 试剂配制20-21
- 2. 方法21-30
- 2.1 实验动物分组21
- 2.2 模型建立21-22
- 2.3 神经功能缺失评分22-24
- 2.4 标本采集24-25
- 2.5 石蜡包埋25-27
- 2.6 石蜡切片27
- 2.7 苏木素与伊红染色27-28
- 2.8 免疫组织化学染色28
- 2.9 主要观察指标及结果判定28-29
- 2.10 图像分析和统计学处理29-30
- 结果30-38
- 1 实验动物大体观察30
- 2 神经功能缺失评分结果30-31
- 3 HE染色结果31-32
- 4 免疫组织化学染色结果32-34
- 5 神经功能缺失评分、梗死面积和梗死侧小胶质细胞数量的相关性分析34-36
- 6 WT小鼠和KO小鼠的脑梗死面积、梗死侧小胶质细胞对比分析36-38
- 讨论38-45
- 结论45-46
- 参考文献46-53
- 综述53-60
- 参考文献57-60
- 在读硕士期间论文发表情况60-61
- 致谢61
【参考文献】
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本文关键词:CX3CR1对缺血再灌注小鼠小胶质细胞调控的研究,由笔耕文化传播整理发布。
,本文编号:371329
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