癫痫持续状态后神经元微管的变化及其与内体—溶酶体系统的关系

发布时间：2022-12-17 20:51

　　目的:癫痫持续状态（Status Epilepticus,SE）是患者或实验动物长时间持续性痫性抽搐导致的一种危及生命的病理状态。癫痫持续状态结束后,经过数日到数周,患者或动物脑内神经元出现迟发性选择性死亡,进而形成反复自发性癫痫发作。神经元结构和功能高度依赖稳定的微管骨架,虽然癫痫持续放电后微管结合蛋白MAP2进行性减少早已为人所知,但是微管损伤与迟发性神经元死亡的关系尚无报道。神经元内膜性细胞器的运输和定位与微管密切相关,因此微管一旦受损神经元的内体-溶酶体系统就会发生瘫痪。然而到目前为止,癫痫持续状态后微管和内体-溶酶体系统的关系还不十分清楚。方法:本实验采用匹鲁卡品诱导的ICR小鼠癫痫持续状态模型,通过尼氏染色和FJB染色检测了海马神经元死亡情况。在此基础上,通过检测微管蛋白β-Tubulin以及β-TubulinⅢ的定位和分布分析了神经元微管的变化;通过检测早期内体标记蛋白Rab5和溶酶体结构蛋白Lamp1的定位和分布,分析了内体-溶酶体在癫痫持续状态后的改变及其与神经元微管损伤的关系。结果:1)神经元死亡检测结果显示,实验组小鼠在SE结束后第1天海马CA1和CA3区神经元开... 

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英文缩略词
第1章 综述
    1.1 癫痫和颞叶癫痫
    1.2 癫痫和迟发性神经元死亡
    1.3 神经元微管骨架
    1.4 癫痫和内体-溶酶体的关系
    1.5 微管骨架和内体-溶酶体在癫痫发病过程中的关联
    1.6 展望
第2章 材料和方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验试剂配制
    2.3 实验方法
        2.3.1 匹鲁卡品癫痫动物模型
        2.3.2 标本制备
        2.3.3 Nissl染色
        2.3.4 F-JB染色
        2.3.5 微管蛋白检测
        2.3.6 内体检测
        2.3.7 溶酶体检测
        2.3.8 β-Tubulin、Rab5 荧光双重染色
        2.3.9 β-Tubulin、LAMP1 荧光双重染色
        2.3.10 统计学分析
第3章 实验结果
    3.1 Nissl染色检测SE后海马神经元损伤情况
    3.2 FJB染色检测SE后海马神经元损伤情况
    3.3 SE后海马各区微管蛋白β-Tubulin的变化
    3.4 SE后海马各区微管蛋白β-TubulinⅢ的变化
    3.5 SE后海马各区早期内体的变化
    3.6 SE后海马各区溶酶体结构蛋白LAMP1的变化
    3.7 双重荧光染色分析微管、内体和溶酶体在SE中的关系.
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
作者简介
致谢



本文编号：3720628