E2F-1基因沉默对人胶质瘤U251细胞生物学特征的影响

发布时间：2023-01-08 16:45

　　目的:探究转录因子E2F-1对胶质瘤U251细胞增殖和侵袭的影响。脑胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤,占颅内原发肿瘤的50%以上,发病人群跨越不同年龄段。手术切除为主,辅助放化疗为其主要治疗方案。胶质瘤呈高浸润性生长,术后容易复发,严重威胁着患者的生存期。准确发现胶质瘤的微卫星灶,利用载体携带治疗药物或基因靶向作用于胶质瘤部位,成为近年来探索胶质瘤治疗的新方向,有望能为胶质瘤的治疗探索出更有效和精确的方法。E2F-1是转录因子E2F家族成员之一,它和异源性蛋DP1/2结合后,成为细胞周期素依赖的蛋白激酶（CDKs）,是下游调控细胞周期和凋亡的重要因子。E2F-1在多种恶性肿瘤中表达异常,为肿瘤发生发展中的一个重要致病因素,但对E2F-1与脑胶质瘤的研究相对较少。本实验利用RNAi技术,敲低胶质瘤U251细胞中E2F-1基因的表达,通过MTT、Transwell实验观察U251细胞增殖能力及侵袭能力的改变。从而为E2F-1对U251细胞生物学特征的影响作用机制,以及为探索脑胶质瘤治疗新途径奠定基础。材料和方法:本研究通过对人胶质瘤U251细胞进行培养,以人胶质瘤U251细胞为研究对象,以制备... 

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料与方法
    2.1 实验材料与仪器
        2.1.1 细胞培养所需试剂
        2.1.2 转染敲低慢病毒
        2.1.3 Real-time PCR所需主要试剂
        2.1.4 蛋白免疫印迹所需主要试剂
        2.1.5 细胞增殖
        2.1.6 细胞侵袭
        2.1.7 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 适宜的嘌呤霉素浓度的选择
        2.2.3 慢病毒转染U251 细胞,嘌呤霉素筛选,构建稳定转染的胶质瘤细胞系
        2.2.4 Real-time PCR、Western-blot测定转染后U251 细胞中E2F-1 基因的沉默效果
        2.2.5 MTT法检测各组U251 细胞OD490 绘制并比较生长曲线变化
        2.2.6 Transwell实验检测各组U251 细胞的侵袭能力
    2.3 统计学分析
3 实验结果
    3.1 荧光显微镜下鉴定转染效果
    3.2 Real-time PCR检测各组U251 细胞E2F-1 mRNA的表达
    3.3 Western blot检测各组U251 细胞E2F-1 蛋白的表达
    3.4 MTT检测各组U251 细胞的增殖能力
    3.5 Transwell检测各组U251 细胞的侵袭能力
4 讨论
5 结论
本论文创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间获得的研究成果
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]HOXB9和E2F1高表达与结肠癌不良预后关系研究[J]. 陈丽梅,方科.  中国现代药物应用. 2018(22)
[2]E2F1基因在急性白血病中的表达及其临床意义[J]. 庄祥龙,官瑞婷,吴诗馨,缪东,秦童.  中国实验血液学杂志. 2018(02)
[3]转录因子E2F1表达对前列腺癌细胞侵袭能力的影响[J]. 毕学成,蒲小勇,刘久敏,黄尚.  中华医学杂志. 2017 (36)
[4]E2F-1与小细胞肺癌多药耐药及预后的相关性[J]. 金沅武,赵媛,孟祥娇.  中国现代医学杂志. 2017(09)
[5]转录因子E2F1调控小细胞肺癌凋亡机制的研究[J]. 苏珊,黄惠怡,邹建军,岑文昌,张贤兰.  实用医学杂志. 2014(22)
[6]Advances and new perspectives in the treatment of metastatic colon cancer[J]. Gonzalo Recondo Jr,Enrique Díaz-Cantón,Máximo de la Vega,Martin Greco,Gonzalo Recondo Sr,Matias E Valsecchi.  World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2014(07)
[7]E2F-1过表达对胃癌细胞凋亡及相关基因表达的影响[J]. 严林海,李雷,谢玉波,肖强,王长青.  癌症. 2009(11)



本文编号：3728834