辛伐他汀对神经源性肺水肿大鼠血清孵育的肺微血管内皮细胞凋亡的影响

发布时间：2017-05-17 21:14

  本文关键词：辛伐他汀对神经源性肺水肿大鼠血清孵育的肺微血管内皮细胞凋亡的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究辛伐他汀对神经源性肺水肿(neurogenic pulmonary edema,NPE)大鼠血清孵育的人肺微血管内皮细胞(Human pulmonary microvascular endothelial cell,HPMEC)凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法:健康的雄性SD大鼠50只,体重250-300g,参考Ishikawa N和Hamdy O建立大鼠NPE模型,收集NPE大鼠的血清备用。将在体外培养的HPMEC,随机地分为3组,分别为对照组,NPE组,辛伐他汀组,每组6个样本,培养24h后收集细胞进行以下检测:MTT法检测各组HPMEC的细胞毒性;流式细胞仪检测各组HPMEC的凋亡率;RT-PCR检测各组HPMEC Bcl-2 m RNA和Bax m RNA的表达水平;WB检测各组HPMEC Bcl-2蛋白和Bax蛋白的表达水平。结果:MTT:与NPE组相比,辛伐他汀组细胞培养24h及48h后活性明显升高(P0.01)。流式细胞仪检测结果:对照组各样本HPMEC平均凋亡率为4.28%,NPE组各样本HPMEC平均凋亡率为35.96%,辛伐他汀组各样本HPMEC平均凋亡率为16.98%;与对照组比较,NPE组、辛伐他汀组细胞凋亡率明显增加(P0.01);与NPE组比较,辛伐他汀组细胞凋亡率明显下降(P0.01)。RT-PCR:与对照组相比,NPE组及辛伐他汀组,Bcl-2 m RNA、Bax m RNA均高表达(P0.01);与NPE组相比,辛伐他汀组Bcl-2m RNA高表达(P0.01),Bax m RNA低表达(P0.01)。WB:与对照组相比,NPE组、辛伐他汀组,Bcl-2、Bax蛋白均高表达(P0.01);与NPE组相比,辛伐他汀组Bcl-2 m RNA高表达(P0.01),Bax m RNA低表达(P0.05)。结论:辛伐他汀可抑制NPE大鼠血清孵育的HPMEC的凋亡,其机制之一可能与其上调Bcl-2表达,下调Bax表达有关。
【关键词】：辛伐他汀 神经源性肺水肿 微血管内皮细胞 凋亡
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R741
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 主要英文缩略语索引8-11
• 第1章 绪论11-15
• 第2章 材料和方法15-27
• 2.1 实验材料15-18
• 2.1.1 主要药物和试剂15-16
• 2.1.2 主要仪器设备16
• 2.1.3 主要试剂配制16-18
• 2.2 实验方法18-19
• 2.2.1 实验动物处理18-19
• 2.2.2 HPMEC分组方案19
• 2.3 检测指标19-25
• 2.3.1 四唑盐比色法（MTT法）检测细胞代谢活性19
• 2.3.2 流式细胞仪检测各组HPMEC的凋亡率19-20
• 2.3.3 Real-time PCR检测Bcl-2、Bax mRNA在各组肺微血管内皮细胞中的表达20-22
• 2.3.4 Western Blot检测Bcl-2、Bax蛋白在各组HPMEC中的表达22-25
• 2.4 统计学分析25-27
• 第3章 结果27-33
• 3.1 辛伐他汀对NPE大鼠血清诱导的HPMEC活性的影响27
• 3.2 流式细胞仪检测各组HPMEC的凋亡率的表达27-29
• 3.3 RT-PCR 检测 HPMEC 中 Bcl-2、Bax m RNA 的表达29
• 3.4 WB检测肺微血管内皮细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达29-33
• 第4章 讨论33-39
• 第5章 结论39-41
• 参考文献41-45
• 文献综述45-53
• 参考文献50-53
• 攻读硕士期间发表的论文及参与课题53-55
• 致谢55

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本文编号：374529