减毒沙门氏菌携带Stat1质粒抑制脑胶质瘤的作用及机制的实验研究
发布时间：2023-03-23 05:07
神经胶质瘤是原发于神经上皮细胞的肿瘤，是中枢神经系统中最常见的恶性肿瘤，约占颅内肿瘤的一半以上，是神经外科疾病中的治疗难点之一。由于其恶性程度高，发病机制尚不清楚，早期诊断困难，5年生存率低，因此成为神经外科领域中的一个世界性难题，同时也是神经外科医生争相研究的焦点。目前恶性胶质瘤的主要治疗手段是手术治疗，术后辅以放射治疗和化学药物治疗。虽然在具体方法上有了不少改进，但总体疗效并没有获得明显改善，死亡率居高不下，因此针对神经胶质瘤病因、发病机理、生物学特性以及新的有效治疗手段的研究仍是神经外科的热点课题。 信号传导与转录激活因子(SignalTransducerandActivatorofTranscription，STAT)是一种信号传导和转录活化因子蛋白，是细胞因子/生长因子信号传导中重要的胞质转录因子，可以从多个方面调节细胞的生长、存活、分化和凋亡。而作为该家族重要成员的Stat1，其作用尤为突出。近来多项研究表明，Stat1可能参与了多种肿瘤的发生和发展，主要表现在4个方面：①Stat1在酪氨酸激酶信号途径中被选择性激活；②Stat1突变的持续性激活能诱导某些细胞的转化；③St...
【文章页数】：112 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
前言
中文摘要
Abstract
第1章 绪论
第2章 综述
2.1 神经胶质瘤的治疗概述
2.2 Stat 家族与癌症关系的研究进展
2.2.1 概述
2.2.2 STAT 信号通路
2.2.3 Stat 蛋白在癌症形成中的作用
2.2.4 小结
2.3 Stat1 与细胞凋亡关系的研究进展
2.3.1 概述
2.3.2 Stat1 蛋白的结构
2.3.3 依赖 Stat1 的干扰素（interferon, IFN）信号通路
2.3.4 Stat1 信号通路的调节
2.3.5 Stat1 在细胞死亡中的调节作用
2.3.6 Stat1 在细胞死亡中的调节机制
2.3.7 Stat1 作为一个潜在的治疗标靶
2.3.8 结论和展望
2.4 减毒沙门氏菌用于肿瘤治疗
2.4.1 沙门氏菌的生物特性
2.4.2 减毒沙门氏菌是一种新型的运载体
2.4.3 减毒沙门氏菌感染引起免疫应答
第3章 材料和方法
3.1 实验材料
3.1.1 主要试剂
3.1.2 主要仪器
3.1.3 原发神经胶质瘤组织及正常脑组织来源
3.1.4 细胞及实验动物
3.1.5 菌株与质粒
3.2 实验方法
3.2.1 Stat1 蛋白在正常脑组织及神经胶质瘤组织中的表达情况
3.2.2 Stat1 质粒的转化
3.2.3 Stat1 质粒的鉴定
3.2.4 重组质粒 pBabe/HA-STAT1/puro 对人神经胶质瘤 U87MG细胞作用的体外研究
3.2.5 pStat1 对人神经胶质瘤作用的体内研究
第4章 实验结果
4.1 Stat1 在人神经胶质瘤组织及正常脑组织中的表达情况
4.2 Stat1 对人神经胶质瘤细胞系 U87MG 的影响及机制的体外实验研究
4.2.1 对质粒 pBabe/HA-STAT1/puro 进行鉴定测序
4.2.2 pBabe/HA-STAT1/puro 质粒转染 U87 细胞
4.2.3 pBabe/HA-STAT1/puro 质粒转染 U87 细胞后，Stat1 在mRNA 及蛋白水平表达情况
4.2.4 用 CCK-8 法检测 Stat1 对 U87 细胞生长抑制率的影响
4.2.5 流式细胞术检测 Stat1 对 U87 细胞凋亡的影响
4.2.6 流式细胞术检测 Stat1 对 U87 细胞周期的影响
4.2.7 Western blot 法检测 p21 及 PCNA 蛋白水平的表达
4.2.8 Stat1 的过表达能够减弱胶质瘤细胞 U87 的迁移
4.2.9 Western blot 法检测凋亡相关基因在蛋白水平的变化
4.3 Stat1 对人神经胶质瘤的体内实验研究
4.3.1 Stat1 对裸鼠神经胶质瘤移植瘤生长的影响
4.3.2 肿瘤组织中 Stat1 蛋白的表达
4.3.3 Western blot 法检测凋亡相关基因在蛋白水平的变化
4.3.4 Stat1 对裸鼠神经胶质瘤移植瘤形态学及凋亡的影响
4.3.5 免疫组化法检测肿瘤组织中凋亡相关蛋白
4.3.6 免疫组化法检测肿瘤组织中 PCNA 蛋白的表达
4.3.7 流式细胞术检测 Stat1 对神经胶质瘤移植瘤凋亡的影响
第5章 讨论
5.1 Stat1 在正常脑组织和神经胶质瘤组织中的表达情况
5.2 Stat1 表达增高对于神经胶质瘤细胞系 U87 的影响及机制研究
5.3 Stat1 对神经胶质瘤作用的体内实验研究
第6章 结论
参考文献
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢
本文编号：3768344
【文章页数】：112 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
前言
中文摘要
Abstract
第1章 绪论
第2章 综述
2.1 神经胶质瘤的治疗概述
2.2 Stat 家族与癌症关系的研究进展
2.2.1 概述
2.2.2 STAT 信号通路
2.2.3 Stat 蛋白在癌症形成中的作用
2.2.4 小结
2.3 Stat1 与细胞凋亡关系的研究进展
2.3.1 概述
2.3.2 Stat1 蛋白的结构
2.3.3 依赖 Stat1 的干扰素（interferon, IFN）信号通路
2.3.4 Stat1 信号通路的调节
2.3.5 Stat1 在细胞死亡中的调节作用
2.3.6 Stat1 在细胞死亡中的调节机制
2.3.7 Stat1 作为一个潜在的治疗标靶
2.3.8 结论和展望
2.4 减毒沙门氏菌用于肿瘤治疗
2.4.1 沙门氏菌的生物特性
2.4.2 减毒沙门氏菌是一种新型的运载体
2.4.3 减毒沙门氏菌感染引起免疫应答
第3章 材料和方法
3.1 实验材料
3.1.1 主要试剂
3.1.2 主要仪器
3.1.3 原发神经胶质瘤组织及正常脑组织来源
3.1.4 细胞及实验动物
3.1.5 菌株与质粒
3.2 实验方法
3.2.1 Stat1 蛋白在正常脑组织及神经胶质瘤组织中的表达情况
3.2.2 Stat1 质粒的转化
3.2.3 Stat1 质粒的鉴定
3.2.4 重组质粒 pBabe/HA-STAT1/puro 对人神经胶质瘤 U87MG细胞作用的体外研究
3.2.5 pStat1 对人神经胶质瘤作用的体内研究
第4章 实验结果
4.1 Stat1 在人神经胶质瘤组织及正常脑组织中的表达情况
4.2 Stat1 对人神经胶质瘤细胞系 U87MG 的影响及机制的体外实验研究
4.2.1 对质粒 pBabe/HA-STAT1/puro 进行鉴定测序
4.2.2 pBabe/HA-STAT1/puro 质粒转染 U87 细胞
4.2.3 pBabe/HA-STAT1/puro 质粒转染 U87 细胞后，Stat1 在mRNA 及蛋白水平表达情况
4.2.4 用 CCK-8 法检测 Stat1 对 U87 细胞生长抑制率的影响
4.2.5 流式细胞术检测 Stat1 对 U87 细胞凋亡的影响
4.2.6 流式细胞术检测 Stat1 对 U87 细胞周期的影响
4.2.7 Western blot 法检测 p21 及 PCNA 蛋白水平的表达
4.2.8 Stat1 的过表达能够减弱胶质瘤细胞 U87 的迁移
4.2.9 Western blot 法检测凋亡相关基因在蛋白水平的变化
4.3 Stat1 对人神经胶质瘤的体内实验研究
4.3.1 Stat1 对裸鼠神经胶质瘤移植瘤生长的影响
4.3.2 肿瘤组织中 Stat1 蛋白的表达
4.3.3 Western blot 法检测凋亡相关基因在蛋白水平的变化
4.3.4 Stat1 对裸鼠神经胶质瘤移植瘤形态学及凋亡的影响
4.3.5 免疫组化法检测肿瘤组织中凋亡相关蛋白
4.3.6 免疫组化法检测肿瘤组织中 PCNA 蛋白的表达
4.3.7 流式细胞术检测 Stat1 对神经胶质瘤移植瘤凋亡的影响
第5章 讨论
5.1 Stat1 在正常脑组织和神经胶质瘤组织中的表达情况
5.2 Stat1 表达增高对于神经胶质瘤细胞系 U87 的影响及机制研究
5.3 Stat1 对神经胶质瘤作用的体内实验研究
第6章 结论
参考文献
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢
本文编号：3768344
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/shenjingyixue/3768344.html
最近更新
教材专著
