MicroRNA-146a在重症肌无力中的作用研究

发布时间：2023-03-24 18:08

　　目的：检测MG患者PBMCs中miRNA-146a的表达水平；研究抑制miRNA-146a后对Torpedo AchR α146-162(Tα)肽段刺激后的小鼠AchR特异性B细胞活化的影响及可能机制,探讨miRNA-146a在MG中的作用,寻找抑制MG中AchR特异性免疫反应的治疗新方法。 方法：以荧光定量PCR检测MG患者组及健康对照组PBMCs中miR-146a的表达水平。合成miR-146a的反义互补链AntagomiR-146a片段作为抑制剂,并以结构相似的无意义片段作为对照物；免疫磁珠分选小鼠脾脏B、T细胞并测定细胞纯度及活性；脂质体HiPerFect负载FITC标记的AntagomiR-146a转染B细胞,流式细胞术检测转染效率；设置空白组、Tα组、Tα+抑制剂组、Tα+对照组,将T、B细胞按照1：3比例共培养2天后,除空白组外均予以Tα刺激,同时Tα+抑制剂组予以AntagomiR-146a、Tα+对照组予以对照物干预。干预后第3天分选B细胞,荧光定量PCR检测miR146a的表达水平、流式检测细胞表面标志CD40、CD80、CD86的表达水平；Western Blot...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
目录
縮略词说明
前言
第一章 材料与方法
    1.1 实验流程
    1.2 实验材料
    1.3 实验方法
    1.4 数据分析及处理
第二章 结果
    2.1 MG患者PBMCs中miR-146a的表达水平
    2.2 分选后所得细胞纯度及活性、抑制剂转染效率
    2.3 小鼠B细胞中miR-146a的表达水平
    2.4 小鼠B细胞表面CD40、CD80、CD86的表达水平
    2.5 小鼠B细胞中TLR4、NF-κB及Bcl-2蛋白的表达水平
第三章 讨论
    3.1 MG患者PBMCs中miRNA-146a的表达水平增高
    3.2 MiR-146a对AchR特异性B细胞的作用
    3.3 MiR-146a调控AchR特异性B细胞TLR4/NF-κB信号通路的可能机制
第四章 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3769596