Cathepsin L在白藜芦醇诱导的脑胶质瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞中的作用

发布时间：2017-05-19 08:14

  本文关键词：Cathepsin L在白藜芦醇诱导的脑胶质瘤细胞凋亡及细胞周期阻滞中的作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本课题以人脑胶质瘤U251和U87细胞为模型,初步探讨cathepsin L在白藜芦醇(resveratrol)诱导细胞增殖、凋亡中的作用及其机制。方法:采用CCK-8法检测细胞活性;集落形成以及annexin V/PI双染流式实验检测resveratrol对胶质瘤细胞U251和U87的细胞毒性作用。Western blot检测resveratrol对cathepsin L以及cyclin A、cyclin B1、cyclin D1和凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达水平的影响,免疫荧光染色检测cathepsin L的变化。PI单染检测药物对胶质瘤细胞周期的影响。用si RNA干扰cathepsin L观察resveratrol对细胞周期及细胞凋亡的影响。U87细胞转染p53突变质粒后,观察细胞对resveratrol的敏感性变化。结果:Western blot结果显示resveratrol能够显著激活cathepsin L,免疫荧光实验进一步验证了给药后胶质瘤细胞cathepsin L的增加。CCK-8、集落形成实验及流式细胞术及western blot结果提示,resveratrol能够诱导细胞的凋亡;U87细胞对resveratrol的敏感性比U251细胞更强。PI单染流式细胞术结果表明resveratrol可以引起U251细胞G1期阻滞,U87细胞为S期阻滞。Resveratrol可以明显下调细胞周期蛋白的表达水平,表明resveratrol确实能够诱导胶质瘤细胞周期阻滞。在干扰cathepsin L以后由resveratrol引起的细胞毒性增强,克隆形成率明显降低,细胞周期阻滞作用增强。U87细胞转染p53突变质粒后,细胞对resveratrol的敏感性减弱。结论:Cathepsin L参与了resveratrol对胶质瘤细胞的增殖,诱导其凋亡和细胞周期阻滞的作用,抑制cathepsin L可以增强胶质瘤细胞对resveratrol的敏感性,并且这种作用具有一定的p53依赖性。
【关键词】：cathepsin L 白藜芦醇 胶质瘤细胞 凋亡 细胞周期
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.41
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 前言8-10
• 实验部分10-17
• 材料与方法10-17
• 一、材料10
• 二、实验方法10-17
• 实验结果17-29
• 1. Resveratrol作用于胶质瘤细胞后cathepsin L的表达增加17-19
• 2. Resveratrol抑制胶质瘤细胞的增殖并诱导细胞凋亡19-22
• 3. 抑制cathepsin L可以增强胶质瘤细胞对resveratrol的敏感性22-25
• 4. Resveratrol可以引起胶质瘤细胞的周期阻滞25-27
• 5. 抑制cathepsin L加剧细胞周期阻滞27-28
• 6. U87 细胞进行p53mut转染后，对resveratrol敏感性减弱28-29
• 讨论29-33
• 结论33-34
• 参考文献34-40
• 综述40-52
• Reference46-52
• 攻读学位期间公开发表的论文52-53
• 致谢53-54

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 ;Combined Detection of Serum Matrix Metalloproteinase 9,Acetyl Heparinase and Cathepsin L in Diagnosis of Ovarian Cancer[J];Chinese Journal of Cancer Research;2012年01期

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本文编号：378155